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        【求助】求助,Luciferase Reporter

        丁香园论坛

        2691
        各位实验前辈好,本人课题需要检测药物处理后wnt/beta-catenine的活性变化,用Luciferase Reporter方法,如何做?没经验,迫切需要各位高手前辈指点。是不是不用转染,直接加裂解液啊?文献都是一笔带过,晕得找不着北,不胜感激!毕业是老板不急的,怎样做你自由发挥,就这点钱,不够你自己再想办法,真希望有人管哪!毕业在即,要命呢!
        文献怎么可能是一笔带过呢
        多看文献 绝对有你想要的
        wnt/beta-catenine的活性有一个报告基因的质粒,或者是稳定株。找最早的文献,有提供信息的。相关的质粒你可以找生化所李林课题组咨询,还可以直接购买,invitrigen应该有,不过有些贵
        这个实验应该叫做双荧光报告基因检测系统,细胞内需要转入一种成为top flash的报告基因,加入一定的激活条件就可以激活这条同路,检测时需要采用荧光检测设备,在检测前加入一定量的底物和stop buffer ,同时读两个数值,这里有种试剂盒来自promega公司的,你可以参考下,价位小包装在1000多左右。祝成功!

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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