• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【求助】miRNA表达载体与luciferase载体共转

        丁香园论坛

        2746
        请问miRNA表达载体与luciferase载体共转,分别用哪个载体比较好?
        之前用软件预测到多个可调控靶序列的miRNA,现在想要确定究竟是哪个真的有作用,构建miRNA表达载体又比较费时,有买过miRNA表达载体能否可以推荐一下?
        miRNA表达载体文献上报道的是比较多,现在主要趋向于用慢病毒载体来表达miRNA。如果你需要直接买已经构建好的的miRNA表达质粒,这是很贵的,几乎都是慢病毒载体的。我知道做的完整与规范的事Dharmacon公司,http://www.dharmacon.com/HomePage.aspx。像国内的做这个载体构建的也不少,但是我认为还是要声誉好的公司稳定性会高一点吧,不过我查了一下,几乎全是慢病毒载体为框架构建而成。
        谢谢楼上,太贵了我就不考虑买了,Dharmacon公司我只看到有microRNA Mimics,如果价格不是太贵的话,倒是可以考虑
        用慢病毒做用起来方便,可以做成稳定表的细胞株,为后期检测做成稳定的系统,可以更好的分析结果。现在的shRNA文库也都是慢病毒系统,为的就是系统的稳定,避免以前研究试验批次间误差。
        谢谢zhujoker和wanghm200810 ,果然很贵啊,不划算,自己做只需要在引物和测序上花点银子,顺利的话构建一个大约在100元左右,呵呵,当然,没算试剂和人工费
        不过要提醒你,要有思想准备,因为不是所有的miRNA的质粒表达载体都表达的。
        ddandgg 的意思是不是说还是用microRNA mimics比较可靠?
        应该是这样的,但microRNA mimics费用比较高。
        microRNA mimics表达载体已经比较多,而且相对成熟,miRNA inhibitor载体相对复杂,目前用病毒法来做的比较认可。pcdna3.1就可以用来做miRNA过表达,现在类似的载体有很多!
        我也见过用cmv的。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序