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【求助】信号通路检测

丁香园论坛

6388
各位战友,小弟想做一个药物干预后信号通路的检测,看药物是否对信号通路有影响,比如ERK、JNK、p38等,请问如何检测这些通路是否被激活或抑制,是否只用简单的磷酸化抗体吗,这些磷酸化的抗体都用商品化的吗?谢谢!
每个通路需要两种抗体,如ERK通路需要 ERK抗体和 P-ERK抗体,这里ERK抗体起到“内参的”作用,代表ERK的总量,药物干预前后的量通常保持不变;而P-ERK抗体用来检测磷酸化的ERK量,若该通路被激活则P-ERK会增加。
需要用商品化的抗体,如CELL SIGNAL、SANTA CRUZ等公司的。
每个通路需要两种抗体,如ERK通路需要 ERK抗体和 P-ERK抗体,这里ERK抗体起到“内参的”作用,代表ERK的总量,药物干预前后的量通常保持不变;而P-ERK抗体用来检测磷酸化的ERK量,若该通路被激活则P-ERK会增加。

我想问下,为什么在药物干预后,ERK的量还会保持不变?难道不是由ERK直接磷酸化吗?希望大虾指教
ERK总量不变,总量=磷酸化+非磷酸化

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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