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请问wb检测信号通路应该怎么敷

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好可口一颗小柠檬

实验室新人没人带全靠自学……只能来求助了

我想检测不同浓度某细胞因子处理后的样本JAK-STAT3和MER/ERK通路变化,我了解到要检测STAT3和pSTAT3,ERK1/2和pERK1/2,请问下这可以在一张膜上实现吗?STAT3在88kDa的样子,ERK1/2在40kDa,我能不能把膜裁成三份,一份敷内参一份敷STAT3一份敷ERK啊……而且我看pSTAT3和STAT3位置差不多,是要先敷STAT3再strippling掉再敷pSTAT3吗?

好绝望,希望有好心人能指导我一下该怎么敷……谢谢大家

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3 个回答

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balalaLy

有帮助

按照分子量大小裁剪,孵不同的蛋白,但是不能裁太小,相同大小或差不多大的蛋白可以用同一张膜敷,先孵表达弱的,显影完洗脱再敷另一个。

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麻黄连翘赤小豆

有帮助

可以一张膜,88和40分子量差的多,就看你能不能跑出来了

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bamboopiggy

有帮助

可以切膜,按照marker切就好,如果想striping,建议先孵磷酸化的,然后striping后,再孵total的

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