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        DNA重组技术中最常用的工具酶

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        限制性核酸内切酶 识别DNA特定序列,切断DNA链


        DNA聚合酶Ⅰ 或其大片段(Klenow)①缺口平移制作标记DNA探针 ②合成cDNA的第二链③填补双链DNA3’凹端④DNA序列分析
        耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶链反应(PCR)

        DNA连接酶 连接两个DNA分子或片段

        多核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化,制备末端标记探针

        末端转移酶 在3’末端加入同质多聚物尾

        SI核酸酶,绿豆核酸酶 降解单链DNA或RNA,使双链DNA突出端变为平端

        DNA端酶Ⅰ 降解DNA,在双链DNA上产生随机切口

        RNA酶A 降解除RNA

        磷酸酶 切除核酸末端磷酸基

        核酸酶
        核酸外切酶 (exonuclease):是从核酸的一端开始,一个接一个把核苷酸水解下来;
        核酸内切酶 (endonuclease):是从核酸链中间水解3’,5’磷酸二酯键,将核酸链切断。

        DNA限制性内切酶 粘性末端配对重组

        同裂酶 有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷酸靶子序列,这类酶称为同裂酶。同裂酶产生同样的切割,形成同样的末端。

        同尾酶 这一类的限制酶来源各异,识别的靶字序列也不相同,但产生相同的粘性末端。由同尾酶产生的DNA片段,是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。

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