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271
- 英文名:
β-AgaraseⅠ
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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶
规格:100U
产地:国产|进口
编号:BTN120623
英文名:β-AgaraseⅠ
β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖(3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖)生成新琼脂-寡糖(1)。β-琼脂糖酶 I 消化琼脂糖,形成不能再成胶的碳水化合物分子,同时释放所俘获的DNA。通常残留的碳水化合物分子或β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA操作。反应原理如下:

本产品来源重组E.coli菌株,此菌株的质粒上携带有β-琼脂糖酶I的基因编码。
本产品无核酸内、外切酶或核酸酶污染,可用于从琼脂糖凝胶中提取DNA。
活性单位定义:1单位指42℃、1小时条件下,消化200μl低熔点琼脂糖或NuSieve琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。
热失活:95℃,2分钟或65℃,15分钟温育可使50单位的β-琼脂糖酶I失活。β-琼脂糖酶I可以在45-50℃保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定β-琼
脂糖酶I。
储存条件:低温运输,-20℃ 保存,有效期一年。
备注:
➤ 琼脂糖:由于在反应温度42℃条件下,溶液必需要呈液态,所以仅低熔点琼脂糖适合于用β-琼脂糖酶I消化。
➤ pH值的敏感性:β-琼脂糖酶I在pH6.5时有最适酶活力,在pH5.0-8.5范围内可以保持>75%的酶活力。
➤ 对盐的敏感性:NaCl或Na2 EDTA浓度在50到500mM之间不影响β-琼脂糖酶I活性。
更多有关β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶关键词:β-AgaraseⅠ,BTN120623,β-琼脂糖酶Ⅰ
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β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶关键词:β-AgaraseⅠ,BTN120623,β-琼脂糖酶Ⅰ
·大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
编号:BTN81024
英文名称:E.coli DH5α Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测,转化效率不低于107,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
本菌种来源于Hoffman-Berling 1100菌种。
| 基因型 | 表现型 |
| deo R | 组成型合成脱氧核糖 |
| end A1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyr A96 | 具有*啶酮酸抗性 |
| hsd R17 | 限制性酶EcoK缺失 |
| △(lac)U169 | lac基因缺失 |
| rec A1 | DNA重组活性降低 |
| Rel A1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| sup E44 | 抑制琥珀突变突变,为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 不能自身合成硫* |
| φ80(lac ZΔM15) | 提供α-互补所需的ω片断 |
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入800μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm(小于225rpm)振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
我公司强烈推荐工具酶系列产品,热情期待您的咨询选购β-琼脂糖酶Ⅰ 工具酶。
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