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- LMAI Bio
- 上海
- LM131180-1
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Universal Enzyme Buffer
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
1mL
工具酶缓冲液，10×产品及特点：
本产品是通用的工具酶缓冲液，跟常见的各种分子生物学工具酶兼容，免去试验中更换缓冲液的麻烦。
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
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文献和实验由于两条链的切口在同一部位被切断，不能成环，完全开放成线状，简称线性DNA。如果要测定质粒DNA的相对分子量，最好把质粒用单一切口的酶水解得到线性DNA片段。三种构型的质粒DNA在电泳时的泳动速度为：共价闭环DNA>线状DNA >开环DNA。 本实验采用限制酶BamHI ，切割pUC18-KanR质粒中插入的分子大小为1200 bp的KanR基因片段。 【器材】 1.水浴箱 2.高压灭菌锅 【试剂】 1.10×限制酶缓冲液
我做NF-kB的EMSA实验方法和结果，条带不好，请大家指点！
。 （7）吸取上清，为核蛋白提取物。 （8）马上进行EMSA实验。 探针制备： 用γ-32P-ATP及T4多核苷酸激酶对合成的转录因子结合和突变型寡核苷酸的两条互补链分别进行末端标记。20 µl反应总体积中，加寡核苷酸10 pmol，10×T4多聚核苷酸激酶缓冲液2µl，γ-32P-ATP 3 pmol，T4多核苷酸激酶10 u，37 ℃反应45 min，再置于68 ℃ 10 min灭活。在离心管中加入退火反应液60 µl，互补配对的两条链的标记产物各20 µl，于95 ℃变性5min，缓慢降温
问题：转化后无克隆菌产生可能的原因：转化过程有问题或感受态细胞失活建议：可通过转化pUC18/19等未切割的可用于抗性筛选的质粒，检测感受态细胞的转化效率和转化操作是否正确问题：插入对照DNA片段的阳性率低可能的原因：10×快速连接缓冲液稀释不当建议：提供的T4 连接酶缓冲液为十倍浓度，10μl 反应体积加1μl T4 连接酶缓冲液问题：连接反应存在问题 连接缓冲液只有低的活性。可能的原因：10×快速连接缓冲液含有ATP，温度波动ATP 易降解。建议：使用一次性分装的缓冲液，避免其反复冻化
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
