免疫细胞功能检测

免疫突触形成中的信号转导及细胞骨架的重新定向 以TCR―pMHC为主的多种跨膜分子能够聚集在是它们在T细胞胞膜脂双层结构中有序移动和聚集的结果。上面提到，起关键作用的是细胞骨架(cytoskeleton)。细胞骨架由微管、微丝和中间丝组成，是一类高度动态化的可随生理条件改变而不断进行组装和去组装的结构，受到细胞内外各种因素的调控。由肌动蛋白(actin)组成的微丝(microfilamin ...

Bruton酪氨酸激酶与X性联无丙球血症 X性联无丙种球蛋白血症(X-1洫kedagammagl。bulinemia，XLA)是临床上首次确定的体液免疫缺陷病，由Brutor于1952年报道，故又称Bruton病。XLA作为常见的原发性免疫缺陷病之一，特点为血清中各类免疫球蛋白缺乏，或只能测得微量的抗体。外周血和淋巴组织中B细胞减少或完全缺乏，淋巴结中无生发中心和浆细胞。本病起病早，在出生 ...

T、B细胞相互作用与B细胞的增殖分化 B细胞对蛋白质抗原的应答及抗体的产生需要T细胞的协助，即要求Th2细胞提供B细胞激活和分化的第二信这一协助发生于T-B细胞间的相互作用，包括两个方面：B细胞从BCR获取抗原识别信号之后作为APC对Th2的激活；以及Th2表达CD40L和分泌细胞因子，协助B细胞进一步分化。 B细胞增殖分化有关的细胞因子 B细胞接受足够强度的双信号后从Go ...

B细胞的抗原提呈作用 B细胞可通过BCR结合抗原并发生胞吞(cndocytosis)摄人BCR-Ag复合物。在抗原加工区室CⅡV中，抗原被降解成肽段，然后抗原肽与进入区室的MHCⅡ类分子结合，表达于B细胞表面并提呈给CD4T细胞。需要指出的是，B细胞以其BCR识别的抗原表位不同于它提呈的供T细胞识别的表位，两者分别来自半抗原和与之结合的载体蛋白(图10-6)，也可以来自同一抗原分子的B表位 ...

T、B细胞间的相互作用 1．T、B细胞相互作用的过程 T细胞为Th2亚群，而B细胞既是Th细胞辅助的对象，又是T细胞活化的APC。图10-7表明，这一相互合作包括一系列过程：①抗原以其B表位(绿色)与BCR结合传递B细胞活化的第一信号，使其C1340与细胞因子受体的表达增加，并使B细胞加工提呈抗原和表达少量D7分子；②B细胞作为APC将带有T表位(红色)的抗原肽提呈给CD4T细胞，供T细 ...

B细胞的增殖与分化在外周淋巴组织中进行。其中，包括B细胞进入B细胞区、识别抗原、与T细胞发生相互作用、出现增殖性原发灶、形成生发中心，并在生发中心中完成抗体亲和力成熟及类别转换，最终形成浆细胞及记忆B细胞。 B细胞可以经过两种途径进入外周淋巴结，一是经由输入淋巴管，二是穿越位于淋巴结中的HEV。下面将要提到，HEV位于T细胞区，该区中的基质细胞、HEV ...

影响生发中心形成的因素 ①B细胞趋化因子受体(BLR)：前已述及，激活的B细胞受趋化因子吸引，从T细胞区迁移到淋巴滤泡，条件是必须表达BLR受体CXCR5。缺失BLR的小鼠，其活化B细胞只能停留在胸腺依赖区和边缘区，不形成生发中心。 ②TNF及TNF受体：已知TNF-α、淋巴毒素α／β(LT-α／lT-β)及相应的受体TNFRl均与初级滤泡和生发中心形成有关。因为敲除TNF、LT- ...

通过与FDC的相互作用激活的B细胞进入淋巴滤泡：经历了抗原识别和T细胞相互作用而被激活的B细胞，除了分化为产生IgM的浆细胞而外，大部分会返回到淋巴滤泡。淋巴滤泡中以网络形式分布着一群FDC，这是与T细胞区广泛分布的并指状树突状细胞(mter山g~tatlngl3(2)在起源与功能上全然不同的细胞成分。后者不属于白细胞，也非来自骨髓前体细胞，既无吞噬功 ...

B细胞发生高频突变的特点 ①通常出现在生发中心。 ②主要发生在重排过的B细胞V区基因，也可发生在V区基因旁侧区，一般不发生在C区基因中。突变大部分集中在重链和轻链V区的互补决定区(complementarlty determining region，CDR)。 ③主要是点突变，偶见发生基因缺失和重复。 ④突变频率很高，每一次细胞分裂约在l 000个bp中发生一个点突变，而 ...

肿瘤的被动免疫治疗过继性免疫疗法 过继性免疫疗法(adoptiveimmunotherapy)是把具有抗肿瘤活性的免疫血清或免疫细胞转输到免疫功能低下的肿瘤患者，在体内发挥抗肿瘤作用，以此达到治疗肿瘤的目的。 1．淋巴因子激活的杀伤细胞 小鼠脾脏细胞或人外周血淋巴细胞在体外培养中，经高浓度的细胞因子(主要为IL-2)诱导后发生扩增，产生一类能非特异性地杀伤自身和异体肿瘤细胞的效应 ...

同种反应性T细胞是参与同种异体移植排斥反应的关键效应细胞，其实验依据为：先天性无胸腺的啮齿类动物(如裸鼠)体内无成熟T细胞，不能排斥移植物；新生儿期摘除正常大鼠或小鼠的胸腺，会发生同样情况；上述情况中，若注射同系正常小鼠T细胞，则小鼠即可对移植物产生排斥反应)。长期以来，有关宿主对同种移植物的识别和效应机制存在诸多令人困惑的问题：首先，无亲缘关系个体间进行同种移植 ...

在医学上应用自体或异体的正常细胞、组织、器官置换病变的或功能缺损的细胞、组织、器官，以维持和重建机体生理功能，这种治疗方法称为细胞移植、组织移植或器官移植。移植术后，受者免疫系统可识别移植物抗原并产生应答，移植物中免疫细胞也可识别受者组织抗原并产生应答，此为移植排斥反应。随着现代免疫生物学和免疫遗传学的发展，逐渐阐明丁移植排斥反应的免疫学本质及其遗传学基础，为临床开展人 ...

由病原体引起的流行病左右了人类历史上的几次重大变迁 公元前430年，斯巴达(Sparta)和伯罗奔尼撒(Peloponnesian)联盟向当时处于文化和权力之巅的雅典人开战。斯巴达人迫使无数村民进入雅典城墙内避难，城市拥挤不堪，瘟疫接踵而来，使大批雅典人死亡。瘟疫使雅典变得如此衰弱，以・致其虽拥有强大的海军队伍，但还是花费了30多年的时间才打败了斯巴达；同时，为之付出的代价是这一城市再也不 ...

靶细胞诱导的CTL细胞颗粒酶胞泌作用【基本原理】 该法通过抗原（靶细胞）刺激CTL的TCR，从而活化CTL。其特点是，可定量测定CTL-靶细胞特异性的相互作用，这种靶细胞诱导的CTL细胞颗粒酶胞泌作用，也可通过测定效应细胞或靶细胞的表面分子作为辅助指标。【试剂及材料】（1） 特异性靶细胞，其表面携带CTL所识别的抗原；（2） 其余材料见方法1（抗TCR介导 ...

125I-UdR释放试验测定NK细胞活性【基本原理】 125I-UdR（125I-2′脱氧尿嘧啶核苷）是胸腺嘧啶核苷的类似物，作为DNA合成的前体物，能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此，可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞，以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞，进行体外NK细胞活性检测。被效应细胞杀伤的�靶细胞溶解后可释放125I-Ud ...

中性粒细胞吞噬功能的测定中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。【试剂及材料】（1） 白色葡萄球菌（2） 肉汤培养基（3） 硷性美蓝液【操作方法】 （1） 菌液的制备 将白色葡萄球菌接种于中，放37℃温箱内培养12h左右；置 ...

中性粒细胞移动功能的测定―琼脂糖平板法【试剂及材料】（1） 琼脂糖和明胶（2） 趋化因子（制备见附注）（3） Giemsa染液（4） 显微测微器【操作方法】（1） 称0.25g琼脂糖，加12.5ml蒸馏水，沸水内加热溶化，冷至47℃；（2） 另取Hanks液2ml，10％明胶25ml和蒸馏水8ml，混匀后加7％的NaHCO32滴；（3） 将二者混匀倒板。在琼脂板 ...

中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑（NBT）还原能力的测定【试剂及材料】(1) 0.1％明胶-Hanks液(2) 0.01mol/L KCN(3) 0.1％ NBT(4) 酵母多糖处理血清【操作方法】（1） 分离中性粒细胞，调整细胞浓度至107/ml；（2） 按下表依次加样：静止时NBT的还原能力激活时NBT的还原能力0.1％白明 ...

中性粒细胞杀菌功能的检测―全血化学发光测定法【基本原理】 过氧化物生成系统在杀菌过程中起重要作用。中性粒细胞被激活时，其NADPH氧化酶亦被活化，发生氧化还原反应，形成过氧化离子，随后通过超氧化物歧化酶（SOD）将其转变为H2O2，参入细胞内杀菌。H2O2在过氧化物酶作用下，形成次氯酸和卤化物是另一种杀菌机理。过氧化离子不稳定，在其分解过程中可激活鲁米诺（氨基苯二酰-肼）类物质，并使之发生荧 ...

MHC-I单体的生物素化分析【试剂及材料】（1）链霉亲和素 0.8mg/ml（2）双蒸水（3）聚丙酰胺凝胶电泳装置及试剂【操作步骤】（1）取2个EP管，分别标上“+”和“-” ，每管加2μg MHC-I单体。（2）用双蒸水将“-”管体积补至10μl（3）在“+”管中加5μl链霉亲和素，用双蒸水将体积补至10μl（4）置室温1小时。（5）每管加10μl 2 X 电泳上样缓冲液不要煮样品，不要加D ...