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        中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的测定

        互联网

        8263

        试剂及材料

        1. 0.1%明胶-Hanks液

        2. 0.01mol/L KCN

        3. 0.1% NBT

        4. 酵母多糖处理血清

        操作方法

        1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度至107 /ml;

        2. 按下表依次加样:

        静止时NBT的还原能力
        激活时NBT的还原能力
        0.1%白明胶-Hanks液
        0.25ml
        0.1%白明胶-Hanks液
        0.2ml
        0.01mol/L KCN
        0.1ml
        0.01mol/L KCN
        0.1ml
        0.1% NBT
        0.4ml
        0.1% NBT
        0.4ml
        酵母多糖处理血清
        0.05ml
        +中性粒细胞(107 /ml)
        0.25ml
        +中性粒细胞(107 /ml)
        0.25ml

        3. 放37℃反应15min,加0.5mol/L HCl 10ml,2000r/min离心15min,弃上清;

        4. 加呲啶2ml,沸水煮10min,2000r/min离心10min,测OD515值。

        结果分析

        中性粒细胞的功能强弱与呈色反应的深浅成正比。

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