中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的测定
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试剂及材料
1. 0.1%明胶-Hanks液
2. 0.01mol/L KCN
3. 0.1% NBT
4. 酵母多糖处理血清
操作方法
1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度至107 /ml;
2. 按下表依次加样:
静止时NBT的还原能力
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激活时NBT的还原能力
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0.1%白明胶-Hanks液
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0.25ml
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0.1%白明胶-Hanks液
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0.2ml
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0.01mol/L KCN
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0.1ml
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0.01mol/L KCN
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0.1ml
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0.1% NBT
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0.4ml
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0.1% NBT
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0.4ml
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酵母多糖处理血清
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0.05ml
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+中性粒细胞(107 /ml)
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0.25ml
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+中性粒细胞(107 /ml)
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0.25ml
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3. 放37℃反应15min,加0.5mol/L HCl 10ml,2000r/min离心15min,弃上清;
4. 加呲啶2ml,沸水煮10min,2000r/min离心10min,测OD515值。
结果分析
中性粒细胞的功能强弱与呈色反应的深浅成正比。