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DNA含量测定

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实时定量PCR(Real

相关专题 Real time PCR的应用mRNA表达的研究 微小残留病变的检测 肿瘤耐药基因表达的研究 病毒感染的定量监测 Vs普通PCR,RT-PCR的优势采用封闭的检测模式,因此扩增产物导致污染的可能性比普通PCR要小得多 。扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行,并且数据的采集、分析全部由仪器自动完成,因此整个检测所需的时间比普通P ...

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The In Situ PCR:Amplification and Detection in a Cellular Co

相关专题 Ernest F. Retzel Katherine A. Staskus Janet E. Embretson and Ashley T. HaaseDepartment of Microbiology University of Minnesota Minneapolis MN 55455Copyright ?1994 The ...

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Multiplex PCR: Critical Parameters and Step

相关专题 O. Henegariu N.A. HeeremaS.R. Dlouhy G.H. Vance and P.H. Vogt1 Indiana University IndianapolisIN USA and 1Heidelberg University Heidelberg GermanyABSTRACTBy simultaneo ...

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原位PCR和原位RT

相关专题 (一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处理10min; (3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min; (4)Nase消化组织37℃ 3 ...

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Optimization of Reactions to Reduce Formation of Primer Dime

相关专题 1. How to Reduce Primer Dimers in a LightCycler PCRIntroductionPrimer dimers are the product of nonspecific annealing and primer elongation events. These events take p ...

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基因组DNA Southern杂交

相关专题 1)基因组DNA Southern印迹的制备 预备 1.用适当的限制性内切酶消化基因组DNA样品(10μg)。 2.进行琼脂糖凝胶电泳。一般用0.7~1.0%的琼脂糖凝胶分离基因组DNA,它在1~15kb的范围内有较好的分辨率,可选用TBE或TAE缓冲液。琼脂糖凝胶电泳需在1V/cm的电压下进行,如果要分离片段大小相似的DNA带,应 ...

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基因定位的方法

相关专题 1.体细胞杂交法 体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。 将从身体分离的体细胞做组织培养进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学(somatic genetics)。体外培养细胞可人为控制或改变环境条件,并可建立细胞株,长期保存,进行各种正常和病理研究。与基因定位有关的是体细胞杂交(somatic cell hybridiza ...

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基因重组中的关键反应和机制讲解【图文并茂版】

相关专题 基因重组技术是想从事生命科学领域的同学不可不懂的关键技术之一,本文以图文并茂的形式展示了基因重组中的限制酶、载体、分子克隆、基因表达以及基因文库中的重要反应和机制。 重组DNA技术是现代分子生物技术发展中最重要的成就之一。即是基因工程(Gene Engineering)的核心技术。 重组DNA技术(Recombinant DNA ...

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基因重组中涉及到的各种方法一览

相关专题 DNA重组是整个基因工程中的关键,其中所涉及到的主要反应,以及每个步骤中溶液的配制数据等不少,本文对其中的质粒提取鉴定、分子杂交、基因转移、DNA制备等实验方法作详细介绍。 一、质粒DNA的提取及鉴定 (一)质粒DNA的提取及鉴定 1.收获细菌 (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌 ...

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定量聚合酶链反应(Q

相关专题 PCR?PCR只是一个简单的不起眼玩艺 ——凯利·穆利斯(Kary Mullis) PCR只是一个概念,所发生的奇迹是:PCR概念变成了可操作的实验系统,变成了一项成熟的技术,后者又上升成为新的概念。 …它最大的特点就是能不断推出新形式。 —— 摘自: A Story of Biotec ...

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Reverse SAGE (rSAGE)

相关专题 Jian Yu ( Email: jianyu@jhmi.edu)Last edited on May 1 2000OverviewThis protocol was developed in Kinzler/Vogelstein laboratories to isolate cDNA fragments correspondin ...

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核酸分离与纯化的原理及方法

相关专题 核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方法的不断出现极大地推动了分子生物学的发展。现就核酸分离与纯化的原理及其方法学进展作一综述。 核酸分离与纯化的原则 核酸在细胞中总是与各 ...

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限制性片段长度多态性RFLP

相关专题 随着对基因认识的不断深入,发现在同种生物的不同个体之间,尽管其蛋白质产物的结构和功能完全相同或仅存在着细微的差异,但在DNA水平却存在着差异,尤其在不编码蛋白质的区域以及没有重要调节功能的区域表现更为突出。这种不影响生物体表型的DNA突变被称为中性突变。 分子生物学技术的不断发展已使得从DNA水平直接分析这类突变成为可能。 目前应 ...

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Bacterial Transformation(细菌转化)

相关专题 IntroductionTransformation is a technique to introduce DNA into bacterial Cells. There are many variations on a common theme but the key points are listed below. Check ...

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DNA的限制性酶切及电泳分析

相关专题 实验目的:  1.掌握限制性核酸内切酶消化DNA的原理。  2.掌握重组质粒DNA的酶切鉴定方法。  3.掌握琼脂糖凝胶电泳分析酶切结果。基本原理  限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA中特定碱基顺序的核酸水解酶(水解磷酸二酯键)。根据酶的识别切割特性、催化条件及是否具有修饰酶活性,可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三大类。通常所指的DNA限制性 ...

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大肠杆菌的转化及重组菌的筛选

相关专题 一、 实验目的学习和掌握转化大肠杆菌的通用方法,并进行转化子的筛选二、 实验原理转化(transformation)是将一种生物(供体)的遗传物质(通常为DNA)转入另一种生物(受体)并使其在受体中得以保存和繁殖的过程。大肠杆菌不是天然感受菌,在低温(0~5℃)环境下经CaCl2处理,细胞壁变松变软后能摄入外源DNA,这种状态称为感 ...

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核酸提取(The Extraction of Nucleic Acid)

相关专题 【实验目的】 1.掌握核酸提取的基本原理和基本方法 2.掌握检测核酸浓度及纯度的原理及方法 【实验原理】 DNA是遗传信息的载体是最重要的生物信息"生物信息分子是分子生物学研究的主要对象因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在 ...

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Mini

相关专题 IntroductionExtraction and purification of plasmid DNA from E.coli can be performed on a small scalewhere DNA is extracted from just 1-2 ml of bacterial culture (mini- ...

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DNA重组技术(Recombinant DNA)

相关专题 【实验目的】 1.掌握DNA重组技术的基本原理和基本方法 2.熟悉质粒DNA的小量制备及酶切鉴定方法 【实验原理】 1.DNA重组技术 重组DNA(Recombinant DNA)技术是遗传工程的核心技术,也是人类在基因和DNA分子水平进行操作的技术。它包括以下几个步骤: 1)重组DNA分子的构建:即将目的基因(DNA或c ...

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Subcloning: restriction enzyme digests, ligation

相关专题 IntroductionThe aim of this protocol is to describe the sub-cloning procedure Ð the techniques used to take a DNA fragment from one plasmid and transfer it to another. ...

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