免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待。根据我们使用的固定剂介绍如下,供参考。 ...
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述,本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【半抗原交联抗体法(Hapten �Coupled techniques)】 近年来,为提高敏感性和 ...
在RIA中,标记抗原质量的优劣,直接影响测定结果,必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原,并保持免疫活性不受丧失。 一、同位素的选择 同位素有稳定性和放射性两种。放射性同位素可利用其衰变时放出的放射线进行测量,这种测量较灵敏而方便,故多用放射性同位素。标记抗原,常用的放射性同位素有3H、14C、131I和125I等。在使用上各有其优缺点,可根据所进行的放射免疫分析的类型特点,标记物制备和供应情况 ...
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫、细胞融合、选择杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产,要经过几个月的 ...
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫、细胞融合、选择杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产,要经过几个月的 ...
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(如辣根过氧化物酶,简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上,宜 ...
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(如辣根过氧化物酶,简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上,宜 ...
同位素标记是一种重要的抗体标记技术,�977年Yalow等在放射免疫测定法所作突出贡献而获得医学和生理学诺贝尔奖。McAb标记同位素后除应用于放射免疫测定外,还可用于竞争结合试验、体内肿瘤定位等。 (一) 原理 氯胺�即对甲苯碘氯胺钠,在水溶液中生成次氯酸,为一种温和氧化剂,当加入到有蛋白质和碘的弱碱水溶液中,可将I2氧化为I+并结合到氨基酸上。如标记条件温和,标记后的McAb仍具有良好的结合 ...
・ Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques like fixation dehydration embedment and subsequent sectioning. ・ 3-Aminopropyltriethoxy ...
Tissue Preparation for Methy Methacrylate Embedding Methyl Methacrylate Embedding Protocols (Energy Beam Sciences Inc.)General protocol for plastic embedding technique Sectioning and Mounting Protoc ...
Fixative Preparation 10% Formal Saline Preparation (Nottingham Pathology Lab) 4% Paraformaldehyde Preparation (Nottingham Pathology Lab) Fixatives (XMMR) Staining SolutionCarazzi's Haematoxylin (No ...
(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合 ...
Laser Capture Microdissection (LCM) Introduction to LCM (BJMU) Preparation LCM and RNA/DNA extraction of Frozen Tissue Sections (NIH Laser Capture Microdissection Core Lab) Preparation and LCM of P ...
・ Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques like fixation dehydration embedment and subsequent sectioning. ・ Cryosectioning (House ...
Microwave Processing Techniques for Microscopy (Energy Beam Sciences Inc.)Introduction to microwave technique and detailed protocol for its applications Special Stains Using the Microwave (Energy B ...
・ Double Peroxidase (HRP) Immunohistochemical Labeling of Trypsin-Sensitive Antigens (KPL)・ Immunohistochemistry (Tyner lab)This is a basic immunohistochemistry protocol. Protocols for ...
・ Tips and hints for the storage of antibodies (Synaptic Systems) ・ Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose (KPL) ・ Production of Monoclonal Antibody (Chisho ...
Making Antibody ・ Production of Polyclonal Antibody in Rabbit (Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin bleeding procedure obtaining serum precipitation of IgG.・ GST ...
Antibody PurificatioinPurification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose (KPL) Purifying Antibodies (Perkin-Elmer) Precipitation MethodsProtein A or Protein G Columns or BeadsAntigen Columns ・ ...
Biotinylation of Antibody ( Contributed by Nanci Donacki) Antibody labeling (House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers. Coupling Colloidal Gold to Protein (Walter Steffen) Gold ...