细胞功能测定

1. 3流式细胞技术检测法原理：包绕着鞘液的单细胞或微粒经过流式细胞仪检测区域时被激发光激发出荧光信号，形成的不同波长荧光信号被光电倍增管接收后转换为电信号并进一步转换成计算机可识别的数字信号。其应用范围广泛，常用于细胞生物学、细胞遗传学、免疫学、肿瘤学、血液学等领域。应用：1）了解细胞大小及颗粒度2）细胞状态：pH 值、氧化还原、氧自由基、Ca2+3）细胞表面蛋白：CD 系列等4）细胞内蛋白： ...

The plasticity of differentiated adult cells could have a great therapeutic potential but at the same time it is characteristic of progression of serious pathological states such as cancer and fibrosi ...

1. 4细胞活性测定原理：根据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan，并可被酶标仪检测，间接反应活细胞数量。对于细胞增殖、凋亡、生长受抑等可通过细胞数量间接得知的生物学改变，采用细胞活性测定可以提供可应用和参考的数据。应用：用于生物活性因子的活性检测、大规模药物筛选、细胞增殖、细胞毒性、药敏实验等一般流程：1） 细胞种于96孔板中，按照客户需要进行各种处理2） ...

1. 2 稳定转染细胞株的构建原理：稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。应用： 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究）一般流程：1） 筛选浓度测定： ...

Comparison of lysis methods Sonication most efficient method of cell fractionation problem: heat build up which can denature proteins (proportionate to length of sonication) precaution: do on ice and ...

Cell cycle analysis of Escherichia coli cells C period = the time for a round of chromosome replication D period = the time between the end of a round of chromosome replication and cell division Deter ...

MaterialsPlate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & EquipmentFalcon tubes 500μl Eppendorf tubes on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating pipettor 5ml pipette ...

Electrocompetent CellsFrom Danijela Dukovski at Harvard Medical School. This protocol works well. --Julie Norville MaterialsDI water10% GlycerolSpecial EquipmentCentrifugeIce water bathLiquid nitrogen ...

INTRODUCTION Flow cytometry is frequently used to assess nucleic acid content in individual cells. Based on DNA content alone however cells in the quiescent G0 phase cannot be discriminated from cells ...

Protocols for Neural Cell Culture 2001 Humana.pdf美国进口bioworld抗体几大优势：1.2800多种美国进口一抗二抗，重组蛋白，在中国设立现货仓库，在3天内迅速到货。我们与顺丰快递合作的，运输没有问题2.质量保证，参考文献已突破400篇 ，很多权威客户在使用这个品牌抗体，如药物所，诺华，罗氏，中科院，复旦，交大，北大，清华，浙大等，完善的技 ...

A fluorescence-based in vitro assay for investigating early endosome dynamicsSina V Barysch12 Reinhard Jahn1 & Silvio O Rizzoli2ABSTRACTEarly endosomes receive material from the plasma membrane by fus ...

前言G-偶联蛋白受体（GPCRs），即 7-跨膜蛋白，是当今临床与科研药物的单一治疗靶点，也是迄今发现最大的靶点家族。据推测人基因组中，该家族的功能成员超过300个，涉及多种不同细胞与组织间的广泛信号途径。研究证实，对GPCR功能的调节，有助于免疫学、神经病学、心脏病学与肿瘤学领域多种疾病的治疗。通过应用新的基于细胞水平的受体功能检测技术，候选药物对新调节子的确认率显著提高，损耗率（定义为临床前检 ...

磷酸钙转染法材料：质粒DNA指数生长的真核细胞2 M CaCl22×HBS （pH 7.05）配方:2×HBS （pH7.05）：900 ml 超纯水中加入NaCl 16.3 g KCl 0.74 g Na2HPO4 0.214g，Glucose 2.4 g 和HEPES 10 g，调pH 至7.05，定容至1 升，过滤（0.2 μm 滤膜）后储存于4℃备用。方法：1. 细胞分盘： 通过胰酶消化收 ...

流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析。其优点如下：1、具有操作简便，只要 ...

一、surface marker染色1、收获细胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗涤一次，倾倒后滤纸吸干管口液体。2、加入预先配置好的你需要染的surface marker的抗体混合液（即CD3，CD4，CD8抗体mixture），充分混匀，室温下孵育20分钟。3、FACS Buffer 2 ml洗涤一次倾倒后滤纸吸干管口液体。二、Intracellular St ...

目的：流式细胞仪开机程序、预设获取模式文件、设定和调整、样品分析、关机程序一．开机程序1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。2．打开储液箱，倒掉废液并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮 ...

流式细胞术(Flow cytometry，简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质，如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术，能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于细胞生物学、免疫学、发育生物学、细胞动力学、生理学、分子生物学等生物学研究的各个领域【--，在其基础 ...

摘要：随着科技水平的不断深入，科研设备的不断更新，国家对科研投入的不断增多，植物检测技术也得到了进一步的发展。流式细胞仪植物检测技术是近几年在我国刚刚兴起的一项新技术，对许多植物科技工作者来说还比较陌生。本文用比较通俗的语言介绍了进行流式细胞仪分析所必须的基本概念、发展历史、工作原理、知名品牌、常见型号及其在植物上的应用。关键词：流式细胞仪；植物；检测技术Flow CytometryZhao Ho ...

一、流式细胞术常规检测时的样品制备 (一)直接免疫荧光标记法 取一定量细胞(约1X106细胞／ml)，在每一管中分别加入50μl的HAB，并充分混匀，于室温中静置1分钟以上()再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入)，。孵育20-60分钟后，用PBS(pH7．2―7．4)洗1-2次，加入缓冲液重悬，上机检测。本方法操作简便，结果 ...

一.睡眠性阵发性血红蛋白尿PNH睡眠性阵发性血红蛋白尿（PNH）是一种获得性造血干细胞异常，临床主要表现为骨髓丧失造血功能、血栓、慢性溶血性贫血急性发作。PNH的发病率很低，发病原因不详，可能与再生障碍性贫血有关系。PNH的临床表现不一，疾病进程多变，给临床的诊断治疗和疾病研究带来很多困难。最近15年，在PNH的细胞和分子生物学研究中取得了重要进展，定义了导致PNH异常表现的分子缺陷。而使用流式细 ...