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laiy115 各位战友，一直在查关于环腺苷酸热稳定性的文章，可是好像都没有找到。请教大家谈谈cAMP热稳定性的问题，除了在酶作用下会形成AMP，加热情况会怎么样呢？dianaofyezi 一般cAMP都是在体内或者细胞内发挥作用的，所以对于热的研究应该不会很多。fightingwanghong 我也做通路的 是个新手不知您用什么方法测定cAMP的浓度啊？上海中医药的那个试剂盒好用不 先谢谢了wangleisdnu PepTag® N ...

cctj06 请问VEGF-2578C/A多态性中2578代表什么意思？另外，其中的符号“-”代表什么意思？谢谢！zjubell 找到启动子,然后往前数2578位.就是这个位点了.zhujoker 就是在2578位存在碱基的变化，具体形式不太统一。大家在文献中一般用的都是习惯或者说惯用名称。具体表现在以下几种形式：一、突变信息之间加上位置信息主要有三种方式：比如说突变信息之间加上cDNA的位置，如C188T；突变信息之间加上DN ...

wangruimishu 哪位高手知道MTT实验如果用盐酸异丙醇溶解结晶的话，浓度该是多少呢？多谢赐教！！ylhuang0502 酸化异丙醇（0.1N HCL+无水异丙醇）详细步骤可参见：http://www.biotf.cn/read-htm-tid-221-page-e-fpage-1.htmlcyclin 很不错的东西wangruimishu 多谢 ylhuang0502本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...

adamsw 请问对于endosome，尤其是early endosome，其形态主要有两种，一种是小点状，vesicle like，另一种是tubular like，请问这两种形态代表着endosome的功能方面有什么不同吗，查了好久了没有查到，有哪位达人有这方面的文献吗，感激不尽。freecell 在图书馆借本这个书看看： Endosomes and lysosomes: a dynamic relationshipadamsw freecell wrot ...

恬馨儿 focal adhesion turnover比如这三个单词我们都认识，可是三个词连起来是什么？ylhuang0502 楼主提了一个好问题，是否和译为“黏着斑周转”，因为"focal adhesion"不是固定不变的，所以要"turnover", 其实只要理解意思就行啦，至于贴切的译法，就不用太在意啦。恬馨儿 呵呵，谢谢。但是我想引用这句话，所以想要一个贴切的译法。不过你现在的译法译得比我好，谢谢了！恬馨儿 粘附迁移？还是局部粘附迁移？还是粘 ...

free123 请问各位高人，如果ip证实A蛋白与B蛋白有相互作用，如何研判两者的作用是受体配体的作用还是一般的蛋白相互作用？谢谢！gingivalis 我倾向于不要把 蛋白质之间属于受体配体结合还是其他相互作用区分得如此严密。受体配体原指胞外信号分子（主要是化学小分子）与膜受体之间的相互作用。其特点是特异性，高亲和力，饱和性，可逆性，引发生理反应，比如G蛋白。（胞内受体配体也是同样的，比如核受体）从这几点出发，要区分两（多）个 ...

wxhong 大家好，最近加入了一个课题，由于本人经验很浅，于是上 来向大家讨教经验。我把我们的实验流程写下了，大家帮忙看看，给写建议，谢谢大家对细胞染毒----CCK-8法测IC50-----以 IC50为最高浓度递减对细胞染毒----通过Western blot做目标蛋白的表达量变化----使用重叠PCR法将TAP基因立连上目标基因----构建pcDNA3.1/重组载体----荧光定量PCR和 Western Blot检测组合蛋白的表达-----用TAP法 ...

hljzyydx 最近看到一篇文章，里面提到了5'-deoxyribose-5-phosphate(5'-dRP) lyase以及5'-dRP/AP lyase的概念但是我查了半天也没搞明白这到底是指什么，请各位好朋友指点！！谢谢大家了。。freecell http://www.brenda-enzymes.org/php/result_flat.php4?ecno=4.2.99.B1http://www.pnas.org/content/95/21/ ...

xyqtf 如题！那么NF-κB属于哪一类？谢谢！xyqtf 啊，这个研究信号转到的版块，还没有兄弟分清这个概念吗，还是太简单不消一顾。谢谢能帮助我一下。doctormy xyqtf wrote:如题！那么NF-κB属于哪一类？谢谢！NF-κB是核转录因子，不属于炎症介质or炎症因子。查阅了最新版的八年制病理教科书，只找到炎症介质的定义，未找到炎症因子的定义或提法。zfyyzz00 doctormy wrote:NF-κB是核转录因子，不属于 ...

ssair 各位，请问质粒pFLAG-CMV2中的pFLAG是什么意思？hyjtb 如果没有估计错的话，应该是从一种有鞭毛的菌中提取出来的治理改造过的载体，如果有谁知道得更确切，指点一下大家。。赫赫。。zhujoker 只是载体上的一个标签，可以用于构建融合蛋白，以便于检测抗体不好的蛋白。yabxxh 严重同意版主的签名本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信 ...

wangbing2053688 哪位大侠有CHO细胞偏爱密码子，请不吝赐教，谢谢！freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17086290http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9358069wangbing2053688 非常感谢！wangbing2053688 不知哪位大侠能不能将表格发给我啊？文章下不下来啊！wangbing2053688 没有人理我啊？有没 ...

cdongni 我测蛋白质用的是Bradford法，实验室的酶标仪只有570nm 没有595，请问大家，用570测稳定吗？准确吗？我现在的R2只能到96！zhujoker 这个问题你只能问公司了？最好还是找一个595nm测吸光度的。但是做流失时像这种差距还是能做的，但是不知道是不是也适合测蛋白？dlzhangyu 可以的。以下是来自碧云天的说明书：使用说明：1. 完全溶解蛋白标准品，取10μl稀释至100μl，使终浓度为0.5mg/m ...

shuaibo2008 新手请教各位高手，我准备做AngII的相关实验，不知道如何分装保存，是买来的全都-20°C分装保存，还是先称取一部分分装，如果是称取部分的话，能用0.22um的滤器滤过吗？说明书很不详细啊。期待帮助哦，太感谢了zhujoker 你一部分分装也是分，还不如全分装。只要分装无菌完全可以不过滤的。侠骨仁医 如果不是在短期内使用的话，我建议你分装粉末，而不要溶解，因为溶解稀释后，浓度相对较低比较容易降解；如果万一 ...

luowen__ 各位前辈：小弟是刚开始做实验的研究生，老板要我检测组织中的BCL-2，Bax和caspase-3的表达。但是检测方法却没有具体说明。我想请教各位前辈有没有做过以上三种因子的检测，是用WB、RT-PCR检测，还是买专门的试剂盒检测，或者还有其他的方法？另外，什么方法检测比较便宜（我老板的经费不多）？小弟在这里先谢谢了！magichunter （1）经典的方法还是做WB，当然抗体比较费钱。（2）有专门测定caspa ...

summityoung 请问大家，用最普通的HEK293细胞能包装慢病毒码？谢谢freecell 从文献上看，已经有多篇文献报道了用HEK293来包装细胞。但是包装的效果可能没有其它293衍生细胞好。例如293FT来源于293细胞，293FT和293T细胞一样，都是转化了SV40大T抗原的293细胞的一个衍生物。这些细胞系具适宜的包膜和高表达反转录酶，能提高逆转录病毒的滴度。与293T细胞相比，293FT生长的更快， ...

longytu 将两种荧光蛋白质粒导入细胞，观察FRET信号，怎么样给相互作用的两种蛋白定量？应该从哪个角度着手，荧光强弱，表达浓度？大家有没有更好的方法来活体细胞内定量蛋白质？版主freecell留言:自己提出解决问题的方法，然后请别人点评，这才叫“讨论”。你这个帖子纯粹就是求助，何故冠以“讨论”之名？freecell 质粒转染细胞后，可以通过流式或者WB，对蛋白进行粗略的相对定量。longytu 谢版主的回复。。。除了流式和WB ...

徐州往事 我想做大鼠的p38MAPK的试验，需要用到SB203580干预，请问在大鼠中，SB203580的给药途径和剂量，最好能提供相关文献。谢谢piaopiao5556 彼此彼此 ，我也做这个的 各个文献用量不一样，尤其关于大鼠的很少，看到一篇要用到50mg/kg。实验1小时前给药，哪来这么多钱啊？624980241 侧脑室 给药的量是 多少啊 ？ldmin 貌似从1mg/kg——10mg/kg都有人在用。。。大鼠。。。。我也在查，，我打算用1mg/kg ...

forevercan 想请教下园子里的各位xdjm们一个问题，那就是LY294002：PI3K/AKT阻断剂的问题，LY294002是PI3K通路的阻断剂，他到底是阻断了PI3K的蛋白表达，也就是说使PI3K的蛋白得表达下降了；还是阻断了PI3K蛋白的磷酸化，说明书只是说体外培养的细胞加入该阻断剂后，可以抑制AKT的磷酸化，但是对PI3K的蛋白及其磷酸化PI3K蛋白的改变未提及。请指教。forevercan 自己顶一 ...

tang1227 绿色荧光转基因小鼠的皮肤移植到普通小鼠身上N天后，肉眼看到皮肤明明还在，但是荧光显微镜下却看不到荧光，这是为什么？是不是荧光会自身淬灭？还是有其他原因？zjubell GFP小鼠荧光很强的，见附件，我这只是全身表达GFP的。在UV下照，裸露的皮肤都能看到荧光。怀疑你的皮肤已经坏死了，那不表达这个蛋白了，自然就没荧光了。bigbang_0_0 zjubell wrote:你的皮肤已经坏死了纠正一下，是你的小鼠的皮肤 ...

brainpower 对大鼠进行体内转染，Muramatsu等报道在材料一致的情况下，电穿孔法的基因导入和表达效率明显高于其它方法，且适用于多种组织的操作。可是现在又不提倡电穿孔法了。因为实验经费的问题，我又不能去将一些转染方法进行对比。求助体内转染哪个方法转染效率更高？freecell 体外转染取决于细胞系，体内转染取决于组织和转染分子，不能一概论之。brainpower 谢谢你的解答。我是想转染到大鼠的腓肠肌上。那么 ...