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        【求助】Bradford

        丁香园论坛

        1762
        我测蛋白质用的是Bradford法,实验室的酶标仪只有570nm 没有595,请问大家,用570测稳定吗?准确吗?我现在的R2只能到96!
        这个问题你只能问公司了?最好还是找一个595nm测吸光度的。但是做流失时像这种差距还是能做的,但是不知道是不是也适合测蛋白?
        可以的。以下是来自碧云天的说明书:
        使用说明:
        1. 完全溶解蛋白标准品,取10μl稀释至100μl,使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液
        中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
        2. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液
        足到20μl

        3. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中,加标准品稀释液到20μl
        4. 各孔加入200μl G250染色液室温放置3-5分钟
        5. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
        6. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
        http://beyotime.com/bradford.htm

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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