细胞信号转导

不安分得土壤 我做的实验是抗肿瘤药对肺纤维化干预作用，研究目标是验证抗肿瘤药是通过MAPK哪些通路起作用，分组如下：A 空白 对照组B TGF刺激组C TGF+ERK阻断剂PD98059D TGF+JNK阻断剂SP600125E TGF+P38阻断剂SB283580F TGF+抗肿瘤药我的困惑是 1：前期PCR做出来检测1、3型胶原SMA居然没有差异性，考虑为药物降解原因或者TGF配制时未按照说明书用柠檬酸活化 2：做WB检测P—ERK，P--P38、 ...

aoe3721 请问 在信号转导过程中 参与信号转导的各种蛋白与通路激活前相比有什么变化啊。其在细胞内的含量会发生改变吗。还是仅仅是发生蛋白结构上的改变。谢谢。selleckchem01 两种情况都可能发生~细胞内含量变化的例子：当Wnt蛋白于细胞表面Frizzled受体家族结合后的一系列反应，包括Dishevelled受体家族蛋白质的激活及最终细胞核内β-catenin水平的变化。 Dishevelled (DSH) 是细胞膜相关W ...

zhangyinghua8106 研究A药处理对经典Wnt/beta-catenin信号通路的影响，结果发现A处理以后gsk-3 beta 总蛋白量减少，磷酸化gsk-3 beta也减少，而beta-catenin总蛋白增加，磷酸化beta-catenin也增加，这该怎么解释呢？不能说明beta-catenin的增加是由于gsk-3bata的减少吧？我该怎么解释这两个分子之间的关系呢？焦急等待中！望高手指点，谢谢了！！zhangyi ...

wudan821 最近一直在研究mTOR信号通路，看了很多文献发现这个信号通路是目前抗肿瘤的热点，很多文献已经明确指出mTOR的下游分子是P70S6K和4EBP1，但是在这 两个下游分子后就很少有人去研究了，我对这个信号通路也只是了解个皮毛，想求助战友谁知道在这两个下游分子之后还能研究什么？这两个下游分子是这个信号通路的终结吗？我最近看了很多信号图谱，发现JAk-PI3K-AKT-mTOR-STAT3这一信号通路，这 ...

SYendocrine 想请问各位大虾，sonic hedgehog通路的特异性激活剂是什么？（附加：另外有没有哪位知道该通路在肾小球系膜细胞中是否表达，如果想测是否表达通过RT-PCR测SHH，通过Elisa法测shh蛋白就行了么？）请各位大虾不吝赐教！！大鹏鸟 好像只有SHH能激活，没看到有文献说有其他激活剂的。想测表达与否还是通过传统的方法,RT-PCR ,WESTERN，ELISA等SYendocrine 大鹏鸟 wrote:好 ...

流产 请教各位高手，我初涉信号转导方面的实验，想用EGFP表达一段编码信号蛋白的真核序列，这样就会使GFP蛋白和信号蛋白融合在一起，好处是转染的时候比较方便，不用大量的做验证工作，但GFP蛋白相对较大，我担心GFP蛋白会影响信号蛋白的空间结构，使得不能发挥正常的生物学功能，请教有经验的高手，有什么建议？请赐教paroxysm 融合蛋白可能会影响目的蛋白的亚细胞定位这也是标签蛋白为什么都很短的原因之一大鹏鸟 标签蛋白太大 ...

xiangcate 做动物血管免疫组化结果显示药物能抑制nf-kb通路，并下调MCP-1的表达，但对同样是nf-kb通路下游的IL-8，ICAM-1没有下调作用，如何解释？谢谢！xiangcate 有人知道吗！microlabm300 可能IL-8有其他通路的串话调控paroxysm 很正常。严谨的话，需要染色质免疫共沉淀来确定NFkappaB的下游基因的调控。xiangcate paroxysm wrote:很正常。严谨的话，需要染色质 ...

summer027 各位站友，小弟打算做干预手段对Akt、TSC1/2、Rheb、mTOR、4E-BP1、P70S6K、AMPK磷酸化表达的影响，不知道有没站友知道做这样的实验大概要花多少钱呢？主要是试剂方面的。另外，请问判断mTOR信号通路的变化是用磷酸化表达还是用mRNA表达来反映更好呢？请各位大大指点！！！谢谢！！！zhibinx2007 试剂主要是磷酸化抗体，每种大概3-4000左右，做mTORx信号通路主要是用AKT ...

zhoujianheng 求助哪位大侠有完整的雄激素受体（AR）信号通路图，请提供帮助小熊and大熊 楼主现在有了么？能分享一下吗？zhoujianheng 楼主雄激素受体信号通路怎么才能看到呢？candyyoung 楼主如今是否找到？能否共享给晚辈，谢谢感激不尽！ ***版主dachong99留言:园子不允许留邮箱，站内消息沟通即可xvyipeng 求转发雄激素受体（androgen receptor,AR）信号通路图，×××××版主dach ...

烟雨无心客 请问大家有知道炎症信号通路中TNFa的特异性抑制剂是什么的吗？如果有文献最好。万分感谢！xiaoxiaoga Lenalidomide (Revlimid)Pomalidomide这两个是TNF-ALPHA的抑制剂，xiaoxiaoga References on Lenalidomide (Revlimid): H Quach et al. Leukemia. 2010, 24:22–32 http://en.wikipedia.org/wiki/Lenalid ...

13406538020 受体型酪氨酸酶激酶的作用方式有以下几种(1)激活磷脂酶C，(PLC，)介导的膜磷脂磷脂酰肌醇一4，5二磷酸水解并产生细胞内第二信使信号通路；(2)激活磷脂酰肌醇一3激酶(P13K)，①产生脂磷脂酰肌醇一3，4二磷酸或脂磷脂酰肌醇一3，4，5三磷酸信号通路，②产生细胞内强氧化物过氧化氢(H：Oz)信号通路；(3)激活Src激酶等细胞内非受体酪氨酸激酶信号通路；(4)激活小G蛋白Ras-丝裂原活化蛋白激酶(mi ...

小猪爬墙 如果我要寻找转录因子的下游因子怎么做，比如我发现基因A表达下调了可以导致TGF通路表达下调，想研究其中的机制，具体我该怎么做呢，导师天天催，我都急死了，盼您赐教啊。小猪爬墙 http://www.bioon.com.cn/doc/showarticle.asp?newsid=26539小猪爬墙 http://www.doc88.com/p-47430825856.html本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯 ...

小猪爬墙 各位大虾好，想请教大家下信号通路的实验怎么设计，我的实验是已发现基因A可调节癌基因B的表达，基因A下调可以使癌基因B表达降低，同时某miRNA可以下调A基因表达，能否设计实验通过人为上调某miRNA下调A基因表达，进而使得癌基因B表达降低呢？请教是否可行？我看通路设计中一般都需要敲除中间的某个基因以验证其作用，我的实验设计中上调miRNA后检测基因A然后检测基因B表达，实验中是否需要敲除基因A然后再检 ...

zhoujianheng 哪位大侠有较完整清晰的PI3K/Art信号通路图，谢谢chengbin1217 爱玩的小瓶子 共同学习吧 加油guojunling1201 你好！你找到了吗、能不能发给我一份？大水牛11678 guojunling1201 wrote:你好！你找到了吗、能不能发给我一份？冷枫之孤独王者 cell signaling technology上有本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可 ...

lin123heng 各位战友前辈，最近在研究一转录因子在细胞分化中的作用。想把课题在深化一下，想查找一下该转录因子的上游。请问应使用什么样的试验方法，有没有相关的参考文献。不胜感激。spyl 同样的问题，希望有人赐教浸润性生长 我也是一个初学者，不知我的想法对不对，供参考。先通过shRNA干扰找到转录因子基因的表达调控因子，再通过CHIP来寻找表达调控因子的基因。liangxiaolei 你这是要往上游推，首先通过UCSC或 ...

magichunter 研究背景：已知抑制JNK激酶的活性可以实现药效A,这已经是被反复证明的了.而目前我在实验中发现，药物A可以抑制JNK激酶的活性，并且可以实现药效A。我的问题是：如何证明药物A是通过抑制JNK激酶的活性来实现药效A的？我目前只能想到的做法是：采用JNk的特异性抑制剂处理细胞，如果可以实现药效A，则可以旁证药物A的作用途径。但是这并不能提供直接证据，因此求问是否有其他更好的办法？大鹏鸟 药物A有没有 ...

sin_007 本人近日做TOPflash实验检测wnt通路的激活情况，遇到些许问题，希望做过TOPflash assay或了解wnt通路的战友解疑答惑。1、看了些相关文献，既有分别转染TOPflash和FOPflash，结果用TOP/FOP值来表示的；也有只转染TOPflash，然后就用TOP值来表示的。不知这是什么原因，在什么情况下不用FOP？ 我因为刚刚接触，用的是分别转染TOPflash和FOPflash，但遇到了 ...

折翼的老鼠 各位大侠，我是一个新手。最近看NFκB通路，想知道测NFκB的mRNA表达量有意义么？还是IκBα的mRNA表达量可以代表NFkB的。希望不吝赐教！折翼的老鼠 丁香园里面的大虾们，咋都不见了呢。ronaldo_zj 楼主您好！对于NFκB通路以及您的问题，我有以下几点建议吧：1. 我不知道楼主您是单纯想看NFκB通路有没有激活还是NFκB的表达量的改变？两者其实还是有区别的，因为单纯的NFκB量的改变（无论是mRNA ...

zhangdepu_410 有做出过或者是看到过关于NF-kB激活了，但是snail却被抑制的实验么？我最近做一个实验就出现了这样的结果，查了一些文献NF-kB都是激活snail的，让我很是困惑，希望大家帮帮我！感激不尽！paroxysm 1.检测的NF-kappaB是转录水平上的激活(EMSA等等)还是磷酸化形式的上调(WB)，这里面有些不同。2.检测snail的负调控元件和抑制通路。zhangdepu_410 paroxysm ...

dyp1998 我想请问各位前辈，我想在大鼠细胞中阻断MAPK通路，请问MAPK通路抑制剂有分种属的吗？除了SIGMA公司的还有哪个公司的比较好啊？谢谢。dyp1998 那位大侠能回答我这个问题啊，谢谢了！dyp1998 顶上去蛋蛋豆豆 我也要买这个抑制剂，不知道是选择PD98059还是U0126xiaoxiaoga selleck chemicals 的抑制剂我用过 觉得性价比要比sigma的高很多，而且送货周期也比较短，前些日子还用了 ...