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        【求助】做mTOR信号通路的花费

        丁香园论坛

        2131
        各位站友,小弟打算做干预手段对Akt、TSC1/2、Rheb、mTOR、4E-BP1、P70S6K、AMPK磷酸化表达的影响,不知道有没站友知道做这样的实验大概要花多少钱呢?主要是试剂方面的。
        另外,请问判断mTOR信号通路的变化是用磷酸化表达还是用mRNA表达来反映更好呢?

        请各位大大指点!!!谢谢!!!
        试剂主要是磷酸化抗体,每种大概3-4000左右,做mTORx信号通路主要是用AKT磷酸化的变化来反映。
        zhibinx2007 wrote:
        试剂主要是磷酸化抗体,每种大概3-4000左右,做mTORx信号通路主要是用AKT磷酸化的变化来反映。

        谢谢站友的回复!请问是做一个蛋白就要相应的一种抗体么?比如要测mTOR、AKt、4E-BP1这三个的话,那这三个的抗体都需要?
        不需要作mRNA的表达变化吗?
        是的。你主要检测磷酸化的变化,所以我觉得不需要做mRNA,比如检测磷酸化的AKT,你以AKT蛋白为对照,需要两种抗体,一种是磷酸化AKT,一种是AKT抗体。
        zhibinx2007 wrote:
        是的。你主要检测磷酸化的变化,所以我觉得不需要做mRNA,比如检测磷酸化的AKT,你以AKT蛋白为对照,需要两种抗体,一种是磷酸化AKT,一种是AKT抗体。

        那么请问我如果是要测mTOR、4E-BP1和P70S6K的话,就分别需要磷酸化mTOR、mTOR抗体,磷酸化4E-BP1、4E-BP1抗体,磷酸化P70S6K、P70S6K抗体是吗?然后每种要3-4000,那就是总共需要20000多左右了是吧?小弟没做过这些东西,是个菜鸟,呵呵...
        非磷酸化的抗体也需要订,作为阴性对照来用
        谢谢bioskgher
        解释的不错~~

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

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