细胞培养

51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨 15g眎胨 5g牛肉膏 3g酵母膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层 ...

41 GN增菌液成分:胰蛋白胨 20g葡萄糖 1g甘露醇 2g柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.0制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL，115℃高压灭菌15min。 42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖 5g牛胆盐 20g磷酸氢二钠 8g磷酸二氢钾 2g煌绿 0.015g蒸馏水 100 ...

31营养琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 3g 氯化钠 5g琼脂 15～20g蒸馏水 1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。注:此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面，则应为2%。 32营养肉汤 ...

21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液。3%过氧化氢溶液。试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL。静置于室温(20℃)中30～60min，观察结果。结果:阳性反应，细菌变为黑褐色;阴性反应，细菌不变色。注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。 22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾 34g1mol/L氢氧化钠溶液 175mL蒸馏水 82 ...

11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏 3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠 1g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000mL制法:加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物，移种于苯丙氨酸琼脂，在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴，自斜面培养物上流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。 12 ...

01 糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH7。4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后按0.5%加入葡萄糖分装于有一个倒置小管的小试管内121℃高压灭菌15min。2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后分装每瓶100mL121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10% ...

Materials Fibroblast cells in log phase growth Ca Mg free-phosphate buffered saline (PBSA) 5% (w/v) Glutaraldehyde (GTA) 2% (w/v) Perchloric Acid (PCA) Subbed slides (coated with chrom alum gelatin) a ...

巨噬细胞原代培养方法及步骤。

原代神经细胞培养试验方法及步骤。

神经细胞（神经元）不易培养，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子时，可出现一定程度的分化，长出突起等现象，但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养，不仅能获得生长的胶质细胞，也可形成能传代的二倍体细胞系。

内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞，对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子（tumor angiogenesis factor，TAF）等有很大价值。 以人脐带静脉灌流消化法为例说明培养方法及步骤。

1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？ 要冷藏！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。 2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。 几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长 ...

细胞培养基的种类繁多，细胞培养方式也较多，如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长，对每个细胞培养工作者都很重要。培养基的使用依据不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。 1 细胞培养液的构成 细胞培养液指细胞生长的液体环境，一般指完全培养液，添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。 1.1 细胞培养基&血清模式 血清对于在传统培养基 ...

一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件 1、 温度条件（37 ＋0.5） 2、 pH条件 （7.2-7.4） 3、 气体条件 4、 水的质量（三蒸） 5、 渗透压 6、 营养条件 7、 无菌条件℃ 二、 培养基的分类 1、 平衡 ...

1.为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 2.L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L－谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L－谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L ...

无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无 ...

Materials Castor beans Gradient former Sucrose solutions in 0.01 M EDTA pH 7.5 33% 44% 50% 57% 60% (w/v) ...

Materials Table2 Density and refractive indexes of sucrose Table1 Densities of cell structures in sucrose Sucrose density fractions from Exercise “Sucrose Fractionation of Castor Bean&rd ...

Materials Ultracentrifuge and swinging bucket rotor Percoll NaCl solutions with the following osmolarities:200 300 and 400 mill ...

Materials Sepracell-MN tubes Clinical centrifuge with fixed angle rotor Phase contrast microscope Whole Blood Phosphate Buffered Saline (PBS) + 0.1% (w/v) Bovine Serum ...