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        常用培养基配方

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        5708

        1 GN增菌液

        成分:
        胰蛋白胨 20g
        葡萄糖 1g
        甘露醇 2g
        柠檬酸钠 5g
        去氧胆酸钠 0.5g
        磷酸氢二钾 4g
        磷酸二氢钾 1.5g
        氯化钠 5g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.0
        制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min。

        2 肠道菌增菌肉汤

        成分:
        蛋白胨1 10g
        葡萄糖 5g
        胆盐 20g
        磷酸氢二钠 8g
        磷酸二氢钾 2g
        煌绿 0.015g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.2
        制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min。

        3 亚硫酸铋琼脂(BS)

        成分:
        蛋白胨 10g
        牛肉膏 5g
        葡萄糖 5g
        硫酸亚铁 0.3g
        磷酸氢二钠 4g
        煌绿 0.025g
        柠檬酸铋铵 2g
        亚硫酸钠 6g
        琼脂 18~20g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.5

        制法:

        1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。

        2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。

        3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃

        4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀。冷至50~55℃,倾注平皿。

        注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热。以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。


        44 DHL琼脂
        成分:
        蛋白胨 20g
        牛肉膏 3g
        乳糖 10g
        蔗糖 10g
        去氧胆酸钠 1g
        硫代硫酸钠 2.3g
        柠檬酸钠 1g
        柠檬酸铁铵 1g
        中性红 0.03g
        琼脂 18~20g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.3
        制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板。

        45 HE琼脂
        成分:
        脙胨 12g
        牛肉膏 3g
        乳糖 12g
        蔗糖 12g
        水杨素 2g
        胆盐 20g
        氯化钠 5g
        琼脂 18~20g
        蒸馏水 1000mL
        0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
        Andrade指示剂 20mL
        甲液 20mL
        乙液 20mL
        pH7.5
        制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板。
        注:①此培养基不可高压灭菌。
        ②甲液的配制
        硫代硫酸钠 34g
        柠檬酸铁铵 4g
        蒸馏水 100mL
        ②乙液的配制
        去氧胆酸钠 10g
        蒸馏水 100mL
        ②Andrade指示剂
        酸性复红 0.5g
        1mol/L氢氧化钠溶液 16mL
        蒸馏水 100mL
        将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2mL。

        46 SS琼脂
        基础培养基:
        牛肉膏 5g
        眎胨 5g
        三号胆盐 3.5g
        琼脂 17g
        蒸馏水 1000mL
        再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用。
        完全培养基:
        基础培养基 100mL
        乳糖 10g
        柠檬酸钠 8.5g
        硫代硫酸钠 8.5g
        10%柠檬酸铁溶液 10mL
        1%中性红溶液 2.5mL
        0.1%煌绿溶液 0.33mL
        加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。
        注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用。
        ②煌绿溶液配好后应在10d以内使用。
        ③可以购用SS琼脂的干燥培养基。


        47 WS琼脂
        成分:
        ②胨 12g
        牛肉膏 3g
        氯化钠 5g
        乳糖 12g
        蔗糖 12g
        十二烷基硫酸钠 2g
        琼脂 15g
        Andrade指示剂 20mL
        0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
        甲液 20mL
        蒸馏水 1000mL
        pH7.0
        制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色。
        注:①供沙门氏菌分离用。
        ②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。

        48 麦康凯琼脂
        成分:
        蛋白胨 17g
        眎胨 3g
        猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g
        氯化钠 5g
        琼脂 17g
        蒸馏水 1000mL
        乳糖 10g
        0.01%结晶紫水溶液 10mL
        0.5%中性红水溶液 5mL
        制法:
        1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2。将琼脂加入600mL
        加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用。
        2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板。
        注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。

        49 伊红美蓝琼脂(EMB)
        成分:
        蛋白胨 10g
        乳糖 10g
        磷酸氢二钾 2g
        琼脂 17g
        2%伊红Y溶液 20mL
        0.65%美蓝溶液 10mL
        蒸馏水 1000mL
        pH7.1
        制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。

        50三糖铁琼脂(TSI)
        成分:
        蛋白胨 20g
        牛肉膏 5g
        乳糖 10g
        蔗糖 10g
        葡萄糖 1g
        氯化钠 5g
        硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O〕 0.2g
        硫代硫酸钠 0.2g
        琼脂 12g
        酚红 0.025g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.4
        制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。

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