基本培养基的配制及细胞培养的条件

一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件

1、温度条件（37±0.5℃）

2、pH条件 （7.2～7.4）

3、气体条

4、水的质量（三蒸）

5、渗透压

6、营养条件

7、无菌条件

二、 培养基的分类

1、平衡盐液

2、天然培养基（小牛血清、胚胎液）

3、合成培养基（化学成分清楚）

三、 RPMI1640培养基的配制

1、RPMI1640 10g

2、丙酮酸钠 0.11g

3、Hepes（羟乙基哌碃乙硫磺酸）5.925g

4、NaHCO3 2g

5、三蒸水 1000ml

电磁搅拌，过滤出菌，并进行无菌实验

四、 过滤出菌

仪器：不锈钢正压滤器

材料：纤维素微孔虑膜 （0.22mm孔径）

装好后消毒

五、 完全培养基的配制

RPMI 1640培养液85ml

小牛血清 10 ml

谷氨酰氨 1ml

抗菌素（青、链霉素）1万单位 1ml