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        常用培养基配方(四)

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        4138

        1 营养琼脂

        成分:

        蛋白胨 10g

        牛肉膏 3g

        氯化钠 5g

        琼脂 15~20g

        蒸馏水 1000mL

        制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。

        注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。

        2 营养肉汤

        成分:

        蛋白陈 10g

        牛肉膏 3g

        氯化钠 5g

        蒸馏水 1000mL

        pH7.4

        制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min。

        3 乳糖胆盐发酵管

        成分:

        蛋白胨 20g

        猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g

        乳糖 10g

        0.04%滇甲酚紫水溶液 25m

        蒸馏水 1000mL

        pH7.4

        制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。

        注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。

        4 乳糖发酵管

        成分:

        蛋白胨 20g

        乳糖 10g

        0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL

        蒸馏水 1000mL

        pH7。4

        制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。

        注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。

        ②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。

        5 EC肉汤

        成分:

        胰蛋白胨 20g

        3号胆盐(或混合胆盐) 1.5g

        乳糖 5g

        磷酸氢二钾 4g

        磷酸二氢钾 1.5g

        氯化钠 5g

        蒸馏水 1000mL

        制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2。


        36 缓冲蛋白胨水(BP)
        成分:
        蛋白胨 10g
        氯化钠 5g
        磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O) 9g
        磷酸二氢钾 1.5g
        蒸馏水 1000mL
        pH7.2
        制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶225mL。
        注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。

        37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)
        甲液
        胰蛋白胨 5g
        氯化钠 8g
        磷酸二氢钾 1。6g
        蒸馏水 1000mL
        乙液
        氯化镁(化学纯) 40g
        蒸馏水 100mL
        4。13.3 丙液
        0。4%孔雀绿水溶液。
        制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用。临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可。
        注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液。

        38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)
        基础培养基
        多胨或眎胨 5g
        胆盐 1g
        碳酸钙 10g
        硫代硫酸钠 30g
        蒸馏水 1000mL
        碘溶液
        碘 6g
        碘化钾 5g
        蒸馏水 20mL
        制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀。121℃高压灭菌15min备用。临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL。


        39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)
        基础液:
        蛋白胨 10g
        牛肉膏 5g
        氯化钠 3g
        碳酸钙 45g
        蒸馏水 1000mL
        将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min。
        硫代硫酸钠溶液
        硫代硫酸钠(Na2S2O3•5H2O) 50g
        蒸馏水 加至100mL
        碘溶液
        碘片 20g
        碘化钾 25g
        蒸馏水加至 100mL
        将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规 定量。贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用。
        煌绿水溶液
        煌绿 0.5g
        蒸馏水 100mL
        存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌。
        牛胆盐溶液
        干燥的牛胆盐 10g
        蒸馏水 100mL
        煮沸溶解,121℃高压灭菌20min。
        制备:
        基础液 900mL
        硫代硫酸钠溶液 100mL
        碘液 20mL
        煌绿溶液 2mL
        牛胆盐溶液 50mL
        临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分。分装于灭菌瓶中,每瓶100mL。

        40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)
        成分:
        蛋白胨 5g
        乳糖 4g
        亚硒酸氢钠 4g
        磷酸氢二钠 5.5g
        磷酸二氢钾 4.58
        L-胱氨酸 0.01g
        蒸馏水 1000mL
        1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成。
        制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合。再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL。分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1。

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