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细胞百科

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Basic Fluorescent in situ Hybridization (FISH)

实验概要Fluorescence in situ hybridization method is a kind of physical map drawing method use fluorescent element mark probe to detect probe and split the chromosome or split between the middle period of ...

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Transfecting Suspension Cells(悬浮细胞转染)

实验概要将转移基因整合到细胞染色体DNA上形成稳定表达转移基因的细胞系。实验原理细胞转染技术是目前广泛应用于病毒基因结构与功能以及基因调控等的研究。细胞转染可分为短暂转染和稳定(或永久)转染两种。在短暂转染中被转染基因并不整合至细胞染色体中因而不能随细胞分裂而传代。转入病毒基因的转录或复制可在DNA导入后1~4天通过收集被转染的细胞进行分析。如果病毒基因整合至细胞染色体中则可随细胞分裂而传代就能 ...

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Culture of Peripheral Blood Lymphocytes for Chromosome Analysis

实验概要Provide information about chromosomal abnormalities.实验原理The blood cell karyotyping method was developed to provide information about chromosomal abnormalities. Lymphocyte cells do not normally und ...

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流式细胞术检测细胞凋亡

实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part of development. Inappropriately regulated apoptosis is ...

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Dissociation of Cells from Primary Tissue

实验概要Obtain single cell suspensions from primary tissue.主要试剂0.25% trypsinsoybean trypsin inhibitor主要设备stainless steel mesh 实验步骤1.After dissecting off unusable tissue mince the remaining tissue into 3 ...

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Mouse B cell isolation with magnetic beads

实验概要Isolate B cells from total mouse cells实验步骤细胞实验技术论坛http://bbs.bbioo.com/forum-138-1.htmlPraparation:1.Enough MACS; put RPMI into water bath.2.Put some MACS in 15 ml tube or 1.5 ml tube from cell ...

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Competent Cell Preparation

实验概要Competent cells are those that possess more easily altered cell walls that DNA can be passed through easily. These cells readily incorporate foreign DNA. On example of a competent cell is E. coli. ...

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细胞和细胞器及间质的分离

细胞内各种结构的比重、大小不同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,所以常用不同介质、不同转速、不同时间,通过分级离心,将细胞内各种结构组分(细胞核、核仁、线立体、高尔基复合体、溶酶体、染色体等)分离出来。主要方法是:组织匀浆的制备、离心分级分离各组分、分析鉴定三个步骤。一、细胞的分离 根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直 ...

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细胞的分离

根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直径成比例,也与细胞密度和分离介质密度之间差异成比例,假设细胞为球形,则其在溶液中在引力场内的沉降速度以下列公式表示V= 2g(ρc–ρs)r² ...

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细胞核的分离

细胞核作为一个功能单位,完整地保留细胞物质,并指导RNA合成,后者为蛋白质其它细胞组分合成所必需。因此,细胞的分离是研究基因表达及细胞核形态结构的首要步骤。不同组织来源的细胞经匀浆后,用分级离心或声波处理等方法进行分离纯化。操作方法:1.制备巨噬细胞:取体重约200g大鼠一只,腹腔注射0.2%配制的1%巯基乙酸钾5~6ml两次,5天后处死。冰浴中用生理盐水收集腹腔细胞,生理盐水洗涤细胞、1500r ...

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膜蛋白质的分离

在生物膜(biological membrane)双脂层的结构中,镶嵌着不同类型的蛋白质分子,统称为膜蛋白质。它执行着不同的功能,并构成细胞骨架(cytoskeleton),其分子量分布在1万至24万。 生物膜的主要化学成分是脂类和蛋白质,此外还有糖类,它是以糖蛋白和糖脂的形式存在,生物膜不仅是细胞间的分隔物质和构成细胞的骨架,而且它与机体和细胞内的许多主要功能有关,如物质运输、信息交换、能 ...

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层粘连蛋白(Laminin,LN)的分离

层粘连蛋白(Laminin,LN)是一种主要存在于上皮细胞外基质中的大分子非胶原性糖蛋白(分子量约为20~40万)。其功能与FN相似,影响着胚胎细胞的发育和胚胎团块的形成。现已发现LN与神经细胞的运动、分化及肿瘤的转移关系密切。许多研究都表明LN是机体中一种重要的糖蛋白组分。因此,分离提纯LN将为我们深入地研究细胞外环境与细胞运动、增殖、分化之间的关系,研究肿瘤转移的机制提供方便。基于LN主要存在 ...

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弹性蛋白的分离

弹性蛋白的溶解性极差,一般采取的技术路线是使用多种手段将非弹性蛋白去除,以获得不溶性的弹性蛋白。操作方法:细胞实验技术论坛http://bbs.bbioo.com/forum-138-1.html1. 将富含弹性蛋白的组织(如器官、胸膜、主动脉等)上附着的结缔组织仔细去除。2. 用打碎机将组织在4℃、50%吡啶水溶液中打碎,3000g×10min离心,弃上清,取沉淀。3. 沉淀用冷蒸馏水离 ...

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胶原蛋白的分离

胶原蛋白是细胞外间质的主要成分,占人体总蛋白的1/3胶原蛋白具有广泛的生物活性,参与细胞增殖、运动、分化、以及肿瘤细胞的转移等病理过程。胶原提取物可作为某些特殊细胞培养的基质,模拟细胞的体内环境。胶原可以作为整形及美容的填充物材料,也可用于人造血管的预凝,在许多疾病的诊断与研究(肝硬化、肺纤维化、硬皮病等)中,胶原的提取及分析已成为必要的手段。 目前已发现的胶原类型有13种,结构与功能较清楚 ...

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线立体的分离

线立体是细胞呼吸的主要场所,细胞活动所需的能量主要由在线立体内进行的氧化所产生的能量来供给,建立线立体的关键要保持其完整性及纯度。分离的原则可用分级离心方法,低速去除细胞核及细胞碎片后,再用高速梯度离心分离线立体。 操作方法:细胞实验技术论坛http://bbs.bbioo.com/forum-138-1.html所有操作需在4℃下进行。1. 将饥饿一天的300g雄性大鼠处死迅速取出 ...

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溶酶体的分离

溶酶体是处理细胞吞噬物的细胞器,含有高浓度的各种水解酶类,用于细胞内的消化过程。它被一层单位膜单独包围,含有12种以上的酶,其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶。它们都是消化酶,能分解细胞内的物质,如蛋白质、核酸、多糖类。这种消化酶与细胞内含物的其它部分严格的分开,否则它们将进行自身消化,因此又有“自杀袋”自称。现在认为溶酶体与卵的受精、形态发生、衰老及某些疾病有关,其分离纯化方法可用分级离心,再用 ...

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微粒体的分离

微粒体是一种脂蛋白所包围的囊泡,含核糖核酸、蛋白质和脂类。蛋白质中包括多种与糖类、脂类和蛋白质代谢有关的酶。通过甲基化或氢化作用,使药物修饰而解毒的酶也在微粒体内将。RNA存在于微粒体的小颗粒即核蛋白体中,分离微粒体的方法是利用分级离心方法,去掉细胞核、线立体后,经超速离心法而制备。操作方法:细胞实验技术论坛http://bbs.bbioo.com/forum-138-1.html1.将体重约为 ...

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细胞及亚细胞组分的分离

细胞由细胞膜、细胞核和细胞质组成,细胞质中含有若干细胞器和细胞骨架等,这些也称为亚细胞组分。对于细胞的结构及功能的研究,是细胞生物学的基本课题,其重要的研究手段之一是分离纯的亚细胞组分 。这种拆离的方法,使细胞中各种生物学过程彼此分开,互不干扰,便于确定一种复杂过程中的细节,从而深化我们对细胞整体功能的认识。用这种方法已经阐明了细胞中的许多重要反应,例如蛋白质的合成机制,最初发现细胞质粗提液使R ...

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微粒体酶的制备

在化学致癌致突变的实验研究中,除少数化学物质,如烷化剂、亚硝基酰胺、碱基类似物石棉等不需活化外,大部分化学物质均需经代谢活化或其代谢活化产物才能引起靶细胞的致癌致突变作用。通常用的活化系统为大鼠肝微粒体酶(简称S-9),这是一种复合酶系,广泛地分布在各种哺乳动物细胞的微粒体和核膜上,其主要成分有三种类型,即NADPH-细胞色素P-450还原酶、磷酸胆碱和血红素蛋白以及细胞色素P-450。它们的作用 ...

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染色体的分离

哺乳动物细胞和人体细胞的同步化以及相应的染色体分离方法,其中期染色体的形态与生物学活性良好,而且可以长期保存。这对于研究染色体超微结构和染色体化学性质很有意义。通过分离的染色体介导的基因转移到受体细胞,借以研究哺乳动物和人体染色体的基因定位、基因调控等均是目前体细胞遗传学中十分活跃的领域之一。显而易见,大量高纯度的中期染色体的纯化尤为重要。操作方法:细胞实验技术论坛http://bbs.bbio ...

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