染色体的分离

哺乳动物细胞和人体细胞的同步化以及相应的染色体分离方法，其中期染色体的形态与生物学活性良好，而且可以长期保存。这对于研究染色体超微结构和染色体化学性质很有意义。通过分离的染色体介导的基因转移到受体细胞，借以研究哺乳动物和人体染色体的基因定位、基因调控等均是目前体细胞遗传学中十分活跃的领域之一。显而易见，大量高纯度的中期染色体的纯化尤为重要。
操作方法：
1．收集同步化中期细胞，Hanks’液洗涤2次，以1,000r×3～10min离心，弃上清。
2． 沉淀置于冰冷的分离染色体缓冲液20～30ml中（1mol/L已烯二醇，20mmol/L CaCl ₂ ，0.1mmol/L PIPS pH6.5），低渗处理20min，然后转入带25号针头的20ml注射器中，吹打细胞直至细胞完全破裂，染色体释放出来，置 离心管 ，以300r×5min离心，弃完整的细胞核和非有丝分裂细胞。
3．上层悬液以2,000r×10~20min离心，去除胞浆碎片，并重复2~3次，可获得高纯度的中期染色体。
1．  上述悬液少许，加3:1的甲醇冰醋酸固定，涂片检测分离中期染色体的纯度。