其他PCR技术

本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除荧光光谱学原理(高清版)--Principles of Fluorescence Spectroscopy 3rd Edition (J.R. Lakowicz)The third edition of this established classic text reference builds upon the strengths of its very popular predecessors. Organized as a broadly usef ...

实验中，通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素，这样，一次筛选可以判断出：未转化的菌不具有抗性，不生长；转化了空载体，即未重组质粒的菌，长成蓝色菌落；转化了重组质粒的菌，即目的重组菌，长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步骤，造成IPTG和X-Gal滞销主要是蓝白斑筛选存在假阳性的情况，IPTG和X-Gal的购买、配制、涂布也增加了实验的步 ...

第一个：LOCUS AY651315 1275 bp mRNA linear INV 22-AUG-2004DEFINITION Plasmodium falciparum isolate 2300 putative chloroquine resistancetransporter (crt) mRNA, complete cds.ACCESSION AY651315VERSION AY651315.1 GI:51317937KEYWORDS .SOURCE Plasmodium falcipar ...

杭州公立的男科医院有哪些【浙江省军区医院咨询QQ2641143845 电话0571-87923139】性爱的目标是让双方都获得快感和愉悦，时间不是那么重要，只要合理分配性爱时间，哪怕仅有十多分钟，都能让双方达到高潮。专家介绍说，完整的性爱包括三部分，前戏、实质性交和后戏。总的来说，性爱时间因人、因时而异，一般在二三十分钟左右即可。从时间分配上看，可以遵循2∶3∶2的原则。以20分钟为例，前戏应占6分钟左右，实质性爱为八九分 ...

最近做了CHIP，用Q-PCR方法进行定量分析，现将我对一些文献资料的总结传上，希望对大家有帮助！i. Normalizeeach ChIP DNA fractions’ Ct value to the Input DNA fraction Ct valuefor the same qPCR Assay (ΔCt) to account forchromatin sample preparationdifferences.ΔCt = (Ct - (Ct -Log2 (Input Dilution Factor)))Where, Inp ...

本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除分子克隆实验指南第3版（高清英文版）(molecular_cloning)protocol名称Molecular cloning: a laboratory manual. Vol. 2Molecular Cloning: A Laboratory Manual第 第 1 卷 卷, David William Russell作者John J. Sambrook, David David William Russell版本3, 插图版出版商 ...

放到“精华”帖子中，以期能进一步深入讨论。请大家积极发言，谈谈自己的体会。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)是一种利用耐热的DNA聚合酶在体外扩增DNA的方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。当DNA长度小于2kb时，一般PCR反应都问题不大，均较容 ...

第五节　PCR各处应用模式　　一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR　　密码子具有兼并性，如表22-4，单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的，但可以设计成对兼并引物，扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变，但核苷酸的数量应相同。兼并度越低，产物特异性越强，设计引物时应尽量选择兼并性小的氨基酸，并避免引物3’末端兼并，针对兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA的扩增、克隆和序 ...

从同学那里copy的，与大家共享：增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60% c. 5'端和中间序列要多GC,以增加稳定性d. 避免3'端GC rich, 最后3个BASE不要有GC,或者最后5个有3个不要是GCe. 避免3'端的互 ...

神奇滤布（Miracloth)上海开米化学有限公司性能参数产品名称： 神奇滤布（Miracloth)英文名称： 神奇滤布（Miracloth)产品货号： 1363488产品规格： 原装试剂级别： 生化级产品产地： 原装品牌商标： 原装供应商： 上海开米化学有限公司价 格： 1200元保存与运输： 干燥保存现货状态： 干燥保存产品更新时间： 2008-6-23 21:19:00详细资料： 实验方法技术资料更多信息：公司展示页面诚信指数：5点浏览人数：46联系我们： 供应商联系卡上海开米化 ...

对于在本版出现的零回复求助帖，站友回复这类帖子加分从优！时间为3月26日至4月25日请站友们在原贴下回复，并在这个帖子下回帖给出链接，以便版主及时、区别加分。多谢合作！截至到2005-04-25【交流】平粘端连接的一些注意事项 【求助】 如何将质粒库转为腺病毒文库 【求助】高手帮忙 【求助】国内或者国外哪家公司卖HBx expression plasmid？ 【求助】干海参DNA提取方法 【求助】XL1-blue能否做pSUPER宿主菌 【求助】海洋 ...

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染:主要是由于在P ...

【整理】2006年01月01日 - 2006年02月30日两月来的无应答帖 希望各位战友积极应助 辛苦了！谢谢！by mybbff(求助)关于real time PCR 操作软件opticon 2http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5328144&sty=1&tpg=33&age=0红细胞裂解液http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5580426&sty=1&tpg=10&age ...

在分子生物学领域里摸爬滚打了两年多，在园子里也逛了一年多，没写过什么原创贴子，这算是第一个，只是浅显的经验，希望与大家交流、分享、共勉！！！我看到了很多帖子，大家在查找Gene序列的时候，有些战友总是弄不明白那个是自己想要的序列，因为在NCBI的GeneBank里面搜索以后，实在是有太多的序列出现，而且长短不一，名称各异，DNA，mRNA ……，有点让人眼花缭乱，下面就是我的一点小经验：通常大家都是在Nucleotide里 ...

Nature Protocols 3, - 1452 - 1456 (2008)Touchdown PCR for increased specificity and sensitivity in PCR amplificationDarren J Korbie & John S MattickTouchdown (TD) PCR offers a simple and rapid means to optimize PCRs, increasing specificity, sensitivity and yield, without the need for leng ...

不知道大家做突变的时候都用什么方法。有经验的战友不妨来交流一下啊。说说我的先。由于本人没有这方面的经验，所以**求各位战友的意见和建议啊。大家多多批评指正。我要做一构建好的质粒上约100bp的片段的缺失，利用反向PCR的方法。以下是利用实验室现有资源的实验设计：1 Phosphorylation of the 5’-end of a primer10×kinase buffer 2ulprimer (20uM) 5ul10mM ATP 2ulpolynucleo ...

坑爹啊，一个载体构建，花了我四个月时间，往事不堪回首，为了各位兄弟姐妹们避免重蹈我的覆辙，我就一把鼻涕一把泪的给大家倾诉一下。构建之前啊，我就翻丁香园啊，把里面关于载体构建的精华看了一遍啊，然后呢，以为构建载体很简单啊，以为一个月能搞定啊，所以满心欢喜的就开工了啊。实验室没有载体，就跟别人借。载体借到了，按照文献里报道的选了两个酶切位点，离的太近，先单酶切验证，一切正常。接着往地下做，为了省时间，选用PCR产物直接双酶 ...

PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时 ...

近日因实验需要，搜索了园中关于高GC含量PCR相关的资料，顺便整理了一下，做一个资源链接小结，以方便需要的战友查阅；也欢迎有体会的战友提供实战经验！===============================高GC含量的PCR应注意什么?【求助】高GC含量片段扩增问题如何解决【求助】高GC含量的基因PCR应注意什么？高GC含量PCR困难，求助求助：高GC含量PCR的扩增【求助】5'高GC含量的pcr怎么做啊【讨论】PCR一定要加DMSO吗?【求助 ...

原文链接：http://genloci.biomart.cn/news/134612.htm●?我们有专业的团队以凌建群博士（基因重组操作系统IOS技术发明者，曾任美国斯坦福大学医学院资深研究员和实验室主任）为研发核心，来自美国斯坦福大学、丹麦哥本哈根大学、北京大学、浙江大学、南京大学、厦门大学，东南大学等国内外知名院校的优秀学子加盟。● 我们有成熟的技术平台、齐全的实验设备吉锐生物为您提供完整的基因敲除解决方 ...