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【交流】AFLP

我现在正在做的是AFLP方面的东西,结果检测必须要做变性胶电泳才能看到,但是前一阵子我做的一直不顺,条带少,我试着减少引物的筛选个数和降低退火温度结果还是这样,一时不知道从何处找原因,想求教你的是1、先看看我前两天做的变性胶电泳图片,条带太少,我看到的文献都是说条带在50到100的样子,为什么我跑的是这样子的呢,我做了减少引物的筛选碱基的个数和降低退火温度,结果还是差不多,请问各位做过AFLP的或者是跑变性聚 ...

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【共享】【实验室新手必看】分子生物及基因工程实验操作视频(可下载及在线观看)

此资源转自小木虫,都可以下,相当清晰,但是需要安装米人,本人测试过了。希望好心的版主可以给点积分,谢谢了先对于刚进实验室的新手来说,有太多仪器不懂,有太多操作不了解,现在把浙大基因工程实验操作讲解视频分享给大家,希望能对实验室新手有帮助~1.细菌基因组DNA的提取.wmvhttp://d.namipan.com/d/ba51df852bf4755d02e6a74a8ef3e04000f112bd57a77f042.P ...

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【旧帖整理】有关各种表达载体的详细图谱

本人整理了论坛上关于战友所求助的各种质粒载体的图谱,后面所跟着的网站都是含有前面名称载体的详细图谱,希望对大家能有帮助!质粒pGEM-4Z载体图谱 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5198013_0.htmlpGEX-4T-2载体图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4211077_0.htmlpGEX-4T-1载体图谱:htt ...

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【旧贴整理】关于blast

Blast指南http://www.dxy.cn/bbs/user/download/385095/BLAST%20tutorial%20%28part%201%29.htm如何进行BLAST,如何分析BLAST后的结果,请访问http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Education/BLASTinfo/tut1.htmlblast 讲座幻灯片http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&i ...

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【共享】Nanostring nCounter 荧光条形码标记单分子检测技术

摘要:荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术,其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白,一经问世大受欢迎,其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物 ...

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【原创】DXY站友个人实验记录展播-生命科学包括生物信息学任何专业都可以-最好全面,系统,写细节、经验及当时心情

15天构建三个重组质粒经验--态度决定成败--献给刚刚进入实验室的新战友前言:我自己的课题是单克隆抗体的制备及其初步应用,总共花了六个月的时间基本做完。做完了之后我想现在单抗的文章不可能发到比较好的杂志,就想能不能利用剩下的将近一年的时间来再做一个比较好的课题。下面是从我的试验记录上面摘抄的一部分,也就是构建载体的这一段时间所记录的东西。第一天:同实验室的一位同学是做某蛋白上面的一段的免疫活性的研究,我就像我 ...

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【共享】老外今天把质粒寄来了。

我5月18号向一位韩国Han-Yang大学的教授索要两个基因的质粒。得住于我们园子里面很多贴子的帮助,在他们的帖子的帮助下,今天(6月2号)老外终于把质粒寄来了。前后仅仅半个月和老外的接触,让我深刻体会到国外专家教授的那种科学无私的精神。把与他来往通信贴出来,供以后需要的朋友参考。也宣传一下这位教授(Sang-Hun Lee MD.PhD)的科学无私精神。Sent: Sunday, May 18, 2008 12:34 PMDear Dr Lee,I am wor ...

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DNA的分子量估算,别人给的。

核酸、核苷酸的基本换算DNA电泳基本参数Pfu DNA聚合酶BCIP/NBT & BCIP/INTHistoChoice MBHistoChoice Clearing Agent核酸、核苷酸的基本换算1.核酸的换算:(1)摩尔数与质量:1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmo ...

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一些分子生物学常用实验技术方法,建议加分啦

一些分子生物学常用实验技术方法大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第一节 概 述  在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌,需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。  转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种 ...

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【交流】核酸版2005年5月份明星技术: Switching Mechanism At 5' end of the RNA Transcript: SMART

真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程,因此mRNA的3'末端都带有一段Poly A,这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5'端的序列各不相同,如何获得全长的cDNA,如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA(即RACE),曾经是一个令人困扰的问题。常见的做法是在合成cDNA的双链后在两端连上接头,利用已知的接头序列再进行扩增 ...

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脂质体说明书

以下是我翻译的脂质体说明书,请多指教————————————————————————————InvitrogenLipofectamineTM 2000Cat. No. 11668-027 Size: 0.75 mlCat. No. 11668-019 Size: 1.5 ml含量及保存:LipofectamineTM 2000 为液态,浓度为1mg/ml。储存在4℃,注意不能冻存。重要原则:进行转染时应遵循下面的原则:1.对大多数细胞来说,DNA(ug)与脂质体(ul)混合的比例应为1:2至1:3。例如 ...

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【旧帖整理】质粒提取

1.原理和方法总则操作指南质粒的简单提取特殊类型质粒提取酵母质粒提取 基因疫苗质粒提取 双歧杆菌质粒提取 重组质粒的提取2.质粒的保存与运输质粒的保存低浓度质粒的保存滤纸上质粒的溶解3.试剂与试剂盒Promega的Wizard试剂盒Promega试剂盒效果谈4.经验之谈质粒提取的一点经验 提取失败请注意关于低拷贝质粒简便的质粒提取方法振荡的手法为什么会出现沉淀一篇关于质粒提取的好文章大提质粒经验谈5.质粒的酶切

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【资源】核酸杂交(Southern blot和Nouthern blot)疑惑解析-------送给新手们的礼物

对于刚开始做实验的人来说,收集资料比不可少,然而现在重复性资料很多很杂,要想在较短的时间内获得更过的信息,就必须找到高效的信息资源,我以下的内容也是从各种渠道收集来的资料,我把它们做了整理,截取了其中比较有价值的内容进行编排,希望你看过之后能对核酸杂交有个全面的认识,在做实验时少犯错误。核酸杂交(Nucleicacid hybridization),又称核酸分子杂交。原理:是核酸变性和复性理论。双链的核酸分子在某些理 ...

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【请下载】 Molecular Biology of the Gene(5th edition, 2004)

标题:【申请上传】Molecular Biology of the Gene (Watson J.D., et al., 5th edition, 2004)内容:Molecular Biology格式:PDF大小:110 MB语种:英文简介:http://www.pearsoned.co.uk/Bookshop/detail.asp?item=300126#Description位置:老赵一号航母核酸基因技术区/pub/Molecular Biology of the Gene--------------- ...

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【共享】我们学校基因工程专业的试题及答案

本人倾情上传本校基因工程专业的试题及答案。作为送给核酸技术讨论版的礼物。希望版主加分。基因工程与基因体外表达练习题及其答案一、填空题1. 基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2. 基因工程的两个基本特点是: (1)____________,(2)___________。3. 基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和__________。4. 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段,可以构建显示该区域各 ...

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【共享】分子实验用书经典:基因VIII、分子克隆、精编分子生物学实验指南等

看到很多网友还在找这些相关的书籍,在这里再提供给大家。已测试可以下。文件名称: 现代分子生物学实验技术全套(第二版 卢圣栋主编) 文件格式: PDF文件大小: 55.09MBhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/11310519文件名称: 精编分子生物学实验指南 中译本 奥斯伯 文件格式: PDF文件大小: 20.22MBhttp://down.aybook.cn/book7/aybook.cn_xiandaishengwu1012.pdf文件名称: 分子 ...

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初进实验室的心得体会

半个月前我正式进入实验室学习,老实说,这半个月是痛苦的,也让我感受颇多,这里我愿意把自己的心得和大家分享,尤其希望对那些和我一样刚进实验室或将要进的园友有点帮助。今年是我研究生的第二年,第一年是理论学习,没有进实验室,我老板是领导,脱离科研好多年了,对我们的学习几乎没什么指导,对这一阶段,我的惨痛教训如下:⒈学习,学习,努力学习,千万别逃课,崩管老师好不好,听听总好,说不定什么时候就有启发,千千万万是那门分子生物学及技 ...

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【旧贴整理】关于细胞转染!

整理整个定向园的关于细胞转染的内容如下:干细胞转染率的问题骨髓基质干细胞转染BMP-2骨形成蛋白后分化为骨细胞,之后其转染基因还会长期表达吗?★以上为干细胞与组织工程讨论版版块发表的帖子,共:2个★p19 细胞转染的请教promega用于细胞转染的试剂盒的质粒提取问题,谢谢关于PC12细胞转染请教关于稳定转染的问题,是在受不了了。中秋节,顺便祝丁香园的各位兄弟姐妹中秋快乐,试验顺利!请教关于细胞转染的问题?请教关于 ...

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Promega试剂盒抽提质粒遇到困难,紧急求教高手!

按一下步骤操作,连续两次均抽不出任何东西,请高手指点!抽提用作转染的重组质粒DNA(用5ml菌液)所用试剂盒为Promega公司的Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System,能够去除对细胞有害的细菌内毒素。具体操作步骤如下:(1) 将5ml 培养过夜的阳性菌在室温(24℃)下10000×g离心10 min。弃上清,将离心管倒置至吸水纸上去除剩余水分。(2)加入250µl 重悬液,振荡至完全重悬 ...

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积分大放送:征求核酸版旧帖整理

核酸版有赖于yong主任、liven主任和管理员的倾心建设,以及后期加入的斑竹和各位战友的热情参与,凝聚了不少优秀的资源。为对这些优秀资源进行整理,以便于dxyer更好地利用本版资源,特向广大战友征集“旧帖整理”。有兴趣的朋友可以选择一个核酸基因技术方面的常规角度进行整理。我们将根据劳动量、整理视角的合理性、整理内容的安排的科学性等方面进行评价,赠予2分~5分不等的积分。好机会不容错过!核酸基因技术版期待因为您的 ...

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