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制滴菌素A对小鼠克隆胚胎的染色体重建、DNA复制及转录活性的影响

实验步骤 1. 卵母细胞收集B6D2F1雌鼠注射5 IU马绒毛膜促性腺激素,48h后注射5IU人绒毛膜促性腺激素(hCG)。注射hCG 16h后从小鼠输卵管收集卵母细胞。收集到卵母细胞后,在HEPES-CZB中用0.1% hya 脱颗粒细胞获得裸卵。挑选细胞质均匀的卵母细胞转移入含1%BSA的KSOM液中,然后放入37°C培养箱中待用。2. 精子注射用于核移植利用胞质内精子注射技术(ICSI)制 ...

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干热灭菌

实验原理 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160—170℃),时间长(1—2小时)。但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烤焦,甚至引起燃烧。干热灭菌使用的电烘箱的结构如图Ⅵ ...

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Mag-Binds Plant DNA Protocol For RICE Powder or other foods

实验试剂 Regents to be provided by user 1. Absolute (96%-100%) ethanol 实验设备 Equipments to be provided by user1. Centrifuge capable of 4000 x g.2. 96 well Plate3. Water bath preset at 65-70°C 4. Equi ...

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Omega质粒DNA中量提取流程

实验试剂 1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6915-01:加入80ml无水乙醇 D6915-03: 加入200ml无水乙醇 D6915-04: 每瓶中加入200ml无水乙醇 实验步骤 1. 将带有质粒的E.coli 接种于30-50ml LB/ ...

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Alkali Denaturation of Supercoiled Plasmid DNA

实验步骤 1.To 20 ul of purified concentrated DNA solution add 2 ul of freshly prepared NaOH/EDTA solution and incubate at 37 degrees for 30 minutes.2.Neutralize the reaction by adding : 3 ul 3M NaOAc 5 ...

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诱变物质的微核测定

实验原理 微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具有伍万DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒断片产生的。研究工作证实:整条染色体或好几条也能形成微核。这些断片或染色体在比细胞分裂未期被两个子细 ...

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利用特异性多克隆抗体对磺胺类药物的免疫分析

实验步骤 1. 蛋白螯合根据UV吸光值测量半抗原/蛋白的摩尔比率评价半抗原螯合蛋白(BSA,OVA)。半抗原/蛋白的摩尔比率基本一致,磺胺类药物/蛋白质的摩尔比率范围为20至40;而免疫原和螯合物的比率为3至9;对HRP螯合半抗原/HRPd摩尔比率范围为2至3。2. 免疫免疫原(0.20mg/0.5mLPBS)溶解于0.5mL弗氏完全佐剂中,肌肉注射于雌新西兰白兔(I和II)。间隔21天注射相同 ...

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FFPE Direct PCR Kit

实验步骤 1. Protocol for FFPE Extraction 1) cut a approximately 10 mg FFPE sample into a 2 ml collection tube or suitable vessel cut off the Samples tiny and remove the paraffin wax as far as possible ...

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Standard Protocol For Isolation of DNA From Dried Blood, Body Fluids and Sperm

实验原理 E.Z.N.A.® Forensic DNA Kit uses the reversible binding properties of the HiBind® matrix a new silica-based material combined with the speed of mini-column spin technology. A specifically formula ...

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转化毕赤酵母

实验试剂 1. 转化当天,配制下列试剂:存于4度5% SDS溶液RD(Regeneration Dextrose) 融化琼脂100ml 2. 溶液:转化试剂40%PEG:用水配制40%(w/v)PEG3350(试剂纯)CaT:20mMTris pH7.5,20mM CaCl2SOS:1M山梨醇,0.3×YPD,10mM CaCl23. 每次转化时配制:SED:19mlSE 加1ml 1M DTT ...

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应用足跖增厚法对迟发型变态反应(DTH)的检测

实验原理 SRBC可刺激T淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞,4天后,当再以SRBC攻击时,即可见攻击部位出现迟发型变态反应。 实验设备 1. 游标卡尺(精密度0.02mm)2. 微量注射器(50μL) 实验材料 绵羊红细胞(SRBC) 实验步骤 1. 致敏小鼠用2%(v/v)SRBC腹腔或静脉免疫,每只鼠注射0.2mL(约1×108个SRBC)。2. DTH的产 ...

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合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验(CBMn)分析

实验试剂 2-巯基乙醇(Sigma;M-7522)原液的浓度为14.3 M(纯液体),准备β -巯基乙醇溶液的工作液,加入70μl 2-巯基乙醇原液(14.3M)溶于10 ml PBS ,过滤消毒和储存在阴凉的地方。Bisbenzimide H 33258,(Calbiochem,382061,100 mg)杜尔贝科的磷酸盐缓冲生理盐水无 Mg2和Ca2 (D - PBS)(Si ...

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All-in-One Kit for Immunohistochemical Staining for Tissues with Antibodies

实验试剂 BioModuleTMPBS Ethanol 详细信息: 95%-100%XyleneDAB 实验设备 Light Microscope 实验材料 Coplin jars or staining containers frozen and formalin--xed paraffin embedded tissues 实验步骤 1. Obtain or ...

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大鼠血清、血浆及相关液体样本中皮质醇(Cortisol)含量的检测

实验试剂 1. 大鼠皮质醇(Cortisol)定量检测试剂盒(ELISA)2. 蒸馏水 实验设备 1. 37℃恒温箱2. 标准规格酶标仪3. 精密移液器及一次性吸头4. 一次性试管5. 吸水纸 实验步骤 1. 准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2. 配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3. 加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架 ...

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DNA Purification from Blood or Body Fluids

实验材料 blood 实验步骤 Protocol: DNA Purification from Blood or Body Fluids(Spin Protocol)This protocol is for purification of total (genomic mitochondrial and viral) DNA fromwhole blood plasma serum b ...

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碱性磷酸酶的染色检测

实验原理 本试验是一个酶组织化学试验,酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下,检测酶的存在,定位与活性的学科,即在酶的存在,分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的,包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置,各种酶的自己的位置保证了化学活动的有效进行。酶的定位方法必须准确,其显示方法必须具有高度的特异性,使酶本身具有可见性,这是一种直接的方法,目前主要有免疫 ...

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Human DC Enrichment Kit

实验原理 Add a mixture of biotinylated monoclonal antibodies against non-DC cells to your starting sample. Add Depletion MyOne™ SA Dynabeads® and allow them to bind to the non-DCs during a short incubati ...

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使用 Platinum® Taq DNA 聚合酶 (Platinum® Taq DNA Polymerase),对靶序列进行定性验证

实验步骤 The procedure on the following page is suggested as a guideline and starting point when using Platinum® Taq DNA Polymerase in any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubation tim ...

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BrdU Labeling Protocol

实验材料 Materials Required But Not Provided1. BrdU reagent (Invitrogen Cat. No. 00-0103)2. Cytospin Tubes3. Phosphate-Buffered Saline 4. 0.22 micron filter 实验步骤 1. Labeling with BrdU In Vivo 1 ...

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免疫复合物的纯化

实验试剂 裂解缓冲液抗体蛋白A或蛋白G微球(用含0.02%叠氮钠裂解缓冲液配成10%(V/V)的混悬液,4℃保存)不含DTT的Laemmli样品缓冲液(2%SDS、10%甘油、60mmol/LTris,pH6.8和0.02%溴酚蓝) 1mol/LDTT(保存于-20℃) 实验设备 摇床、抽吸装置(大多是通过导管与负压瓶一室内真空器连接) 实验步骤 1.准备工作蛋白A或蛋白 ...

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