免疫检验

可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。反应中的抗原称为沉淀原，抗体为沉淀素。由于在单位体积内抗原量大，为了不使抗原过剩，故应稀释抗原，并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价。 沉淀反应的种类有环状沉淀、絮状沉淀、荚膜膨胀、琼脂扩散及免疫电泳等。此外还有放射性同位素标记、酶标记等测定法。 1、环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未 ...

近年来，肺癌的肿瘤标志物（tumor marker，TM）研究十分活跃。肺癌常用的肿瘤标志物很多，根据美国NACB准则，这里主要介绍神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前体 （ProGRP）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）和鳞状细胞癌相关抗原（SCCA）等几种比较肯定的肿瘤标志物。表1 国际上不同专家组对肺癌标志物应用的建议 1．神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enol ase，NSE） 是烯 ...

抗原(antigen,Ag)──是一类能刺激机体的免疫系统使之产生特异性免疫应答，并能与相应的免疫应答产物在体内或体外发生特异性结合的物质。 1、抗原具有两种特性： （1）免疫原性(immunogenicity)：抗原能刺激特定的免疫细胞，使免疫细胞活化、增殖、分化，最终产生免疫效应物质（抗体和致敏淋巴细胞）的特性。 （2）免疫反应性(immunoreactivity)：抗原与相应的免疫效应物质（抗体和致敏淋巴细胞）在体内或体外相遇时 ...

目前已有许多新生物学技术应用于免疫学研究，促进了免疫学的发展，丰富了免疫学检测的内容，使免疫学研究与相关疾病的诊断建立在基因水平，提高了检测的敏感性和可靠性。 � 一、分子杂交技术� 分子杂交的基本原理是根据双链DNA经高温解链成两条互补的单链，降温后又可恢复原来的双链。两条不同的单链分子可根据碱基配对的原则，只要它们的碱基序列同源或部分同源，即可全部或部分复性，此称核酸杂交。用来探测DNA的已知互补片段称为DNA探针，通 ...

随着免疫学理论研究的深入，发现的细胞因子日益增多，并在免疫应答的调节和效应中起着重要作用，其在体内水平的高低直接反映机体的免疫状况。细胞因子检测的方法主要分三类：①细胞生物学活性检测法。②免疫学标记技术，常用ELISA。③分子生物学方法，常用逆转录PCR检测细胞因子的mRNA转录的情况。现以生物活性法为例选择性地介绍几种细胞因子的检测。� 一、人类干扰素的检测� 人类干扰素(humaninterferon，HuIFN)有α、 ...

抗原与相应抗体相遇可发生特异性结合，并在外界条件的影响下呈现某种反应现象，如凝集或沉淀，藉此可用已知抗原(或抗体)检测未知抗体(或抗原)。试验所采用的抗体常存在于血清中，因此又称之为血清学反应(serological reaction)。� 一、抗原抗体反应的特点� (一)抗原抗体结合的特异性� 抗原借助表面的抗原决定簇与抗体分子超变区在空间构型上的互补，发生特异性结合。同一抗原分子可具有多种不同的抗原决定簇，若两种不同的抗原分子具 ...

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断，预后及疗效观察等也具有一定意义。� 一、免疫细胞的分离� 体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。常用的方法有密度梯度离心法辅以花环沉降或亲合板粘附法(panning)等。目前最先进的方法是用荧光激活细胞分离仪(fl ...

从上世纪30年代来，癌症的死亡率没有得到很大的改观。科学家们希望能通过从复杂的生物样本中分离鉴定出敏感特异的肿瘤特有的标记，来帮助肿瘤诊断，评估预后，评估肿瘤的分期，复发，药物靶位点等。这就是肿瘤标记物，肿瘤标记物首先是通过利用从肿瘤细胞中提取的单克隆抗体发现的。在获得抗血清后，通过免疫吸附去掉正常细胞，留下肿瘤特异性的抗原，筛选并评估这些候选物成为了寻找新的肿瘤标记物的经典方法。但是这种方面费时又耗力，因此寻 ...

一.1.抗核抗体阳性提示患者结缔组织病的可能,但仍要结合患者的临床表现及各结缔组织病的诊断标准.2.结缔组织病的易感人群一般为中青年女性,老年患者的自身抗体的滴度会升高,但一般为低水平.3.抗核抗体为一大类自身抗体的总称,ANA阳性进一步分型为针对多种核抗原成份特异性的自身抗体,根据间接免疫荧光的荧光模型(抗原底物为HEP-2和肝片)可区分不同的荧光核型,不同核型也有鉴别意义,如SLE多为均质型.MCTD多为颗粒 ...

免疫诊断是临床辅助诊断的重要组成部分，为临床疾病的诊断提供重要的参考信息，随着上世纪60年代人们弄清抗体的分子结构和功能后，免疫学诊断技术得到了突飞猛进的发展。　　在历史上较为经典的免疫诊断是酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA），该方法最先由Engvall和Perlmann两人在1971年发表，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微 ...

补体系统的各组分在体液中通常以非活性状态、类似酶原的形式存在，当受到一定因素激活，才表现出生物活性。补体的激活途径主要有两种，即经典途径和替代途径，此外尚有MBL（甘露糖结合凝集素）途径。 　　经典途径和替代途径两种途径的启动过程不一致，但经典途径的激活可以导致替代途径的活化，反之则不行。 　　补体的其他激活途径即甘露聚糖结合凝集素（MBL）途径，简称MBL途径。此途径开始于急性期蛋白与病原体的结合，而不是抗原复合物形成。 　　1.经典途径 ...

免疫组化染色方法已不是什么很难的问题，操作步骤简单也易掌握，但要染好免疫组化，其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事，但最基本的应从以下方面加以注意：（1） 去除内源酶及内源性生物素　一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织，其中自身含有一定量的内源酶和内源性生物素，而免疫组化各种染色大部分是用过氧化物酶来标记抗体的，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，而组织中的内源性酶同样也能催化底物，使其显色 ...

绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH50）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途径，C1～9任何一种成分缺陷都可使CH50降低，所以此实验反映了总补体的活性。【材料】磷酸缓冲盐水(pH7.4PBS)、2%绵 ...

一．实验课的目的要求免疫学实验课的目的是加强和巩固对课堂讲授的基本理论的理解和体会，学习和掌握免疫学实验的基本操作技术。为今后的实际工作和科研工作打下基础。为上好免疫学实验课，要求同学做到如下各点：1.课前务必做好充分预习，明确实验目的、原理、方法及操作中的注意事项，做到心中有数。2.在实验进程中，严格按照实验指导所列步骤和要求进行操作，坚持实验的严肃性、严格性、严密性。3.真实记录实验结果，对错误的结果要认真分析， ...

【摘要】：影响ELISA中非特异性显色的原因很多，如盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物，操作过程中的问题。本文就这一原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非特异显色降至最低限度，从而提高检测的特异性，并得到更准确、可靠的实验结果。【关键词】 ELISA 非特异性 显色酶联免疫吸附试验（ELISA）自1971年自问世以来，以其敏感性高，特异性强，操作简便、安全，而广泛应用于临床诊断，开创了免疫学诊断的新纪元。但同其它免疫诊断方 ...

1.1 抗体的酶标记及质量鉴定本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上，标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化，洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS，流速为15ml/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度计测A280吸光度值，以洗脱体积为横坐标，吸光值为纵坐标做图，收集第一峰即为酶标抗体峰。标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值，计算免疫球蛋白量、摩 ...

免疫学技术的迅速发展对精度的要求越来越高，一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要。现今发展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害)，而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定，最终趋向于能够检测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定技术，发光免疫分析技术顺应了这一潮流，开创了免疫诊断的新纪元。 发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放 ...

1.酸性磷酸酶染色阳性的是（）。A．CLL的淋巴细胞B．淋巴肉瘤细胞C．多毛细胞白血病细胞D．尼曼－匹克细胞E．B淋巴细胞【解析】酸性磷酸酶染色中可见：①粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞呈阳性。②戈谢细胞为阳性反应，尼曼－匹克细胞为阴性反应。③多毛细胞白血病时多毛细胞为阳性反应，淋巴肉瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞，也呈阳性反应。④T淋巴细胞呈阳性反应，而B淋巴细胞为阴性反应。ABC========== ...

这篇简短的通讯回顾了了EIA和ELISA的历史背景，这两种分析方法是由瑞典斯德哥尔摩大学的Perlmann， Engvall教授以及荷兰的Schuurs和vanWeemen教授独立而同时创造完成的。 当今，在全球医学实验室里广泛应用的全自动分析仪每日可以检测大量的病人标本，其中很多仪器都是运用酶标记的免疫分析技术为检测原理的。自70年代以来，EIA及ELISA的影响主要表现在其作为出现在文献中的频率相当高。临床医 ...

乙型肝炎病毒血清学标志物 乙肝表面抗原（HBsAg）：是乙肝感染的一个特异性标志，是乙肝首先出现的病毒标志物，在急性乙肝的潜伏期，血清中HBsAg即可出现阳性，持续5-6周，于发病后4-5个月内转阴，若阳性结果持续6个月以上，则为乙肝转为慢性感染状态。 乙肝表面抗体（HBsAb）：是乙肝感染后的主要保护性抗体。一般出现于表面抗原消失后以后，在乙肝恢复期缓慢上升，可持续多年。表面抗体表示乙肝恢复，并对乙肝有免疫力。也可见于疫苗接 ...