免疫细胞检测技术

Flow cytometry, also called flow microfluorometry or flow cytofluorometry, employs instrumentation that scans single cells flowing past excitation sources in a liquid medium. The technology is unique in its ability to provide rapid, quantitative, multiparameter analyses on si ...

酗酒引起人类肥大细胞的凋亡1.背景：目前认为酗酒可导致免疫功能抑制，而增加感染的机率，但是确切的机制不明。肥大细胞（mast cell，MC）属于固有免疫系统，可抵御细菌和寄生虫的感染。本文章主要研究了乙醇及其代谢产物乙醛对肥大细胞生存能力、增殖能力和凋亡的影响。2.方法：采用3种细胞系，分别是人类肥大细胞系（HMC-1）、小鼠骨髓干细胞诱导的肥大细胞系（mBMMC）和人类外周血诱导的肥大细胞（HuMC）。用H3掺入法、台酚 ...

过去主要对缺血和炎症损伤的治疗比较注意,对免疫了解的不多,今天看了这个文章,感觉有一个问题不好理解.这个文章关注的Hydroquinone是一种毒性物质, 证明它具有免疫抑制作用.很多免疫抑制物质被用来治疗炎症和缺血损伤,于是认为这个物质也可能用来治疗这类疾病.但看过这个文章,发现作者是为说明这个物质的毒性作用. 当然抑制免疫也是不好的,但不能这么单方面理解. 对过度的免疫应该抑制.那么这个物质对一些自身免役性疾病就应该 ...

1 起源与发展：1983年, Czerki8Dnsky；Sedgwick and Holt:计数 B cells1988年，Czerkinsky: T cell IFN-r1988年，Czerkinsky：双色标记（Dual-Color）1993年，第一台ELISPOT自动分析仪：德国Leica96-97年，出现了新的ELISPOT分析仪2 ELISPOT 和 ELISA的区别：ELISA 回答 “how much”,而ELISPOT回答“What freqency”ELISA是 ...

哈佛大学David R Liu实验室利用体外筛选和高通量测序检测CRISPR/Cas9的脱靶，针对CLTA基因的四个不同靶位点共设计了八条不同序列的gRNA，即每个靶位点有两条gRNA，结果发现，四个靶位点均存在脱靶现象，脱靶效率最高可达84%，同时CRISPR/Cas9的特异性仅与gRNA配对的靠近PAM处7-12bp碱基相关，CRISPR/Cas9存在严重的脱靶效应。该研究成果发表在《Nature Biotechnol ...

题名：Blockade of B7-H1 improves myeloid dendritic cell-mediated antitumor immunity出处：Nat Med. 2003 May;9(5):562-7.作者：Curiel TJ, Wei S, Dong H, Alvarez X, Cheng P, Mottram P, Krzysiek R, Knutson K L, Daniel B, Zimmermann MC, David O, Burow M, Gordon A, Dhurandhar N, Myers L, Berggren R, Hemminki A, Alvarez RD, Em ...

A flow cytometry technique to study nuclear factor-kappa B (NFB) translocation during human B cell activationFabrice Cognasse a, Odile Sabido b, Lydie Béniguel a, Christian Genin a,c and Olivier Garraud a,c,d A olivier.garraud@univ-st-etienne.frImmunology Letters 2003, 90:49-52 G ...

关于ELISPOT试剂盒: 用Mabteck公司的ALP标记抗体吧，配合Millipore公司的Multiscreen-IP 96孔板，所有的试剂都可以减半，照样可以出非常好的结果，undefined96孔的试剂盒我一直做undefined96孔，但BCIP/NBT显色液没试过减半，因为它很便宜。记得当年第一次做实验就出了很好的结果，经过不断摸索，做出的蓝紫色斑点确实非常漂亮，几乎没有非特异斑点，嗯，ELISPOT是我最拿手的实验之一。关于PBMC: ...

1 预期用途Eli-spot分析是设计用于在单细胞悬液中计数分泌细胞因子的细胞数量的方法。这个方法的优点在于只需在体外进行很少的处理从而使细胞因子产生的分析尽可能接近于体内状况。这个技术用于测定在给予一定刺激的情况下细胞因子产生细胞的数目，以及在某种处理或病理条件下的细胞因子产生细胞的数量。2 主要原理细胞刺激后，原位产生的细胞因子被一种特异的单抗捕获，在细胞溶解后，捕获的细胞因子与第二种生物素化的检测性抗体结合 ...

一．开机程序1．检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。2．打开储液箱，倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFlow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。3．将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5－10分钟。排出过滤器内的气泡。4．如果需要打印，打开打印机电源。5． ...

lipo2000是各大实验室，科学院，技术实验室最常用的转染试剂，小小的试剂，价格不菲，经常听到客户说严格按照说明书来操作，还会出现这样或者那样的问题。客户经常抱怨东西贵，还做不出好效果。1. Lipo2000的保存：4℃保存和运输2. Lipo2000的活性：由于Lipo2000是生物蛋白，在4℃保存和运输，所以就算是同一个批号的Lipo2000，只有在刚出厂分装时活性才是相同的。经过供应商的保存、运输（运输的温度控制各不 ...

本授课进度供承担免疫学实验教学（8年制）任务的教师使用和参考，为保证实验课内容充实，有些实验课的内容安排可能超过规定的学时数，希望任课教师能合理安排时间，必要时，可将几个实验内容穿插进行，以保证教学进度。1、单扩、双扩及免疫电泳（示教）共2学时（1）原理、试验方法及注意事项的讲解（15分钟）（2）双扩铺板和打孔（30分钟）（3）单扩打孔和单、双扩加样（30分钟）（4）电泳示教及原理讲解（15分钟）（5）小结10分钟2、溶血空斑试验— ...

一、进入实习室实验要穿白大衣。二、除实验中必用的学习用品外，其他物品不要放在实验台上。书包放桌屉内，衣帽挂衣架上。三、实习室内不允许吃食物或饮料，严禁吸烟。四、实验中一定要保持实习室安静，彼此讨论问题时不要大声喧哗、严禁打闹。五、实验过程要按照教师要求进行操作，如有疑问要请教指导教师。六、爱护实验器材，如有损坏应及时报告教师，需赔偿者按规定办理。七、实验完毕，要清理台面。需冲洗的物品按要求冲洗，需收回的物品按要求摆放整齐 ...

磁性纳米粒子在生物医学方面的应用磁性纳米粒子（MNPs）是近年来发展迅速且极具应用价值的新型材料，在现代科学的众多领域如磁流体、催化作用、生物医药、核磁共振成像、数据储存和环境保护等得到越来越广泛的应用。在科学家、工程师、化学家和物理学家的共同努力下，纳米技术使得生命科学和健康医疗领域在分子和细胞水平上取得很大的进展。磁性纳米粒子是纳米级的颗粒，一般由铁、钴、镍等金属氧化物组成的磁性内核及包裹在磁性内核外的高分 ...

免疫系统可以是一个对抗癌症的强大武器，但如何控制它仍是研究人员需要努力解决的问题。本篇介绍如何利用人体自身免疫系统进行癌症治疗。第一个肿瘤是一个小型黑色素瘤，长在马克戈尔曼（MarkGorman）脖子左侧上。医生将它切除了，并向戈尔曼保证，癌症已经治好了。但八年之后，在一次例行体检中，医生看着戈尔曼的腹部，皱起了眉头，问他是不是一个酒鬼。黑色素瘤已经扩散到戈尔曼的肝脏，缠绕在下腔静脉中，形成一个不能通过手术切除的 ...

一、样品制备1. 变性条件——SDS LB直接裂解用常温或者高温预热过（预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化，但容易遗忘，LB久煮某些性质会改变）的undefinedSDSLB（或者略高1.undefined）直接加 到细胞或者组织上并煮样。通常6孔板细胞80%以上密度，需200ul，其他按平板面积比类推。通常条件下，SDSLB都是过量的（因此不一定要严格参考 SDS LB稀释比）；如果SDSLB不够，样品核酸、蛋白浓度过高时，煮样后会发现tip吸不上来，非常粘、 ...

组织相容性抗原(histocompatibility antigen)： 通过移植鉴定与组织相容性有关的抗原。（机体参与排斥反应的抗原系统多达20个以上） 主要组织相容性抗原系统(major histocompatibility antigen system MHS)： 能引起较强移植排斥反应的抗原。（较弱-minor) 主要组织相容性复合体(major histocompatibility ...

在免疫细胞中，执行固有免疫功能的细胞:吞噬细胞、NK细胞等。执行适应性免疫功能:T、B淋巴细胞，还有APC细胞参与。 一、淋巴细胞 淋巴细胞分为B细胞和T细胞，分别来源于骨髓和胸腺B淋巴细胞 表面的BCR(mIg)及分泌的抗体均为免疫球蛋白。由B细胞介导的免疫称为体液免疫T淋巴细胞 ，TCR为双链分子。细胞毒性T细胞、调节性T细胞(Tr)（辅助性T细胞和抑制性T细胞） 1.T淋巴 ...

IFN-γ（干扰素-γ）主要产生于激活的T细胞和NK细胞。TH1型响应的特点是通过辅助T细胞和细胞毒T细胞产生IFN-γ，所以高水平IFN-γ的产生是由于寄主应对细胞内的病原体产生了有效的防御。酶联免疫斑点法通常用于评估抗原特异的T细胞的功效，即检测IFN-γ的释放。酶联免疫斑点法是一种非常灵敏的免疫检测方法，它可以在单细胞水平检测细胞 ...

一、材料和试剂 1. 抗体 （1）Ratanti-mouseCXCR5-biotin（BP Pharmingen 551960） （2）Goatanti-ratIgG-biotin（BP Pharmingen 554014） （3）Straptavidin-PECy7（B PPharmingen 557598） （4）Ratanti-mous ...