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        免疫学实验课授课进度

        丁香园

        1618
        本授课进度供承担免疫学实验教学(8 年制)任务的教师使用和参考,为保证实验课内容充实,有些实验课的内容安排可能超过规定的学时数,希望任课教师能合理安排时间,必要时,可将几个实验内容穿插进行,以保证教学进度。

        1、单扩、双扩及免疫电泳(示教)共 2 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 双扩铺板和打孔(30 分钟)
        (3) 单扩打孔和单、双扩加样(30 分钟)
        (4) 电泳示教及原理讲解(15 分钟)
        (5) 小结10 分钟

        2、溶血空斑试验——小室液相法(PFC)和分析单扩和双扩结果共 2 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液(30 分钟)
        (3) 离心、灌注小室和封腊(30 分钟)
        (4) 观察和分析单、双扩结果(20 分钟)
        (5) 观察PFC 结果和小结10 分钟

        3、吞噬细胞吞噬试验和免疫荧光染色实验 共 3 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 吞噬细胞吞噬实验(共 65 分钟)
        A. 小鼠注射 SRBC (20 分钟)
        B.小鼠腹腔取巨噬细胞和涂片(30 分钟)
        C.观察结果(15 分钟)
        (3) 免疫荧光染色实验(共120 分钟)
        A. 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液及稀释计数 (30 分钟)
        B.荧光染色(40 分钟)
        C.离心备涂片(20 分钟)
        D. 荧光显微镜观察(30 分钟)
        (4) 小结10 分钟

        4、淋巴细胞转化试验和 ELISA 检测IgE 试验(一)共2 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 取小鼠脾脏和制备单细胞悬液(30 分钟)
        (3) 加样(30 分钟)
        (4) ELISA 包板(20 分钟)
        (5) 小结10 分钟

        5、 ELISA 检测IgE 试验(二)和观察分析淋巴细胞转化试验结果共 3 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 洗板和加抗原(20 分钟)
        (3) 37OC孵育(40 分钟)
        (4) 洗板、加酶标抗体(20 分钟)
        (5) 37OC孵育(40 分钟)
        (6) 洗板、加底物(20 分钟)
        (7) 显色(20 分钟)
        (8) 加终止液和观察结果(10 分钟)
        (9) 观察淋巴细胞转化结果(15 分钟)
        (10) 取小鼠胸腺,制备胸腺细胞悬液(15 分钟)
        (11) 离心(20 分钟)
        (12) Annexin V-FITC 抗体染色(30 分钟)
        (13) 荧光显微镜观察结果(30 分钟)
        (14) 小结10 分钟

        6、细胞毒试验及 E 花环形成(示教)和免疫器官(示教)2 学时
        (1) 原理、试验方法及注意事项的讲解(15 分钟)
        (2) 细胞毒试验加样(30 分钟)
        (3) 37OC孵育(30 分钟)
        (4) 示教E 花环(15 分钟)
        (5) 示教免疫器官——胸腺及脾脏(15 分钟)
        (6) 小结10 分钟

        本文来源:北京大学医学部基础医学院免疫学系
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