细胞技术

自噬（autophagy）是由Ashford 和Porter 在1962 年发现细胞内有“自己吃自己”的现象后提出的，是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体（autophagosome），并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬的形成细胞质中的线粒体等细胞器首先被称为“隔离膜”的囊泡所包被,这种“隔离膜 ...

亲，你还在为流动状态下的细胞培养而苦恼吗？不要怕，ibidi流体剪切力系统为您提供完美解决方案！通常我们都是在静止状态下进行细胞培养（图1右）。但是在体内，很多细胞都暴露在机械剪切力下（图1左），比如血管内皮细胞。如果您的研究涉及剪切力，或者需要在流动状态下进行细胞培养，那么您关注ibidi流体剪切力系统就对啦！图1. 流动状态、静止状态下进行细胞培养的示意图为什么要在流动状态下进行细胞培养呢？在流动状态下和静止状态下 ...

南国小医 近两周SD大鼠的海绵体平滑肌细胞的原代培养老是感染细菌，早上还是好的，到下午就感染了，因为是新手，求一些更详细的操作注意事项，或者一些可以避免的小窍门。万分感谢dachong99 1. 检查培养箱和培养基，可将空白培养基在培养箱中培养来检查。2. 具体手术器械、操作者、操作环境等。这个环节比较多，需要一一排除。建议严格按照protocol进行实验。南国小医 但是我和师兄两个各自培养原代的，师兄是好的，他也是在旁边监督我全程操 ...

queeniee 有木有做细胞的同学可以出来指导一下呀？要做鸡肝脏的体外细胞实验，需要研究激素对肝脏某些基因的表达情况的影响，可是应该取多大同龄的鸡的肝脏合适呢？？？？多大同龄后是鸡肝脏中的生理状态开始趋于稳定呢？急！！！！！求助！！！！如果有相关的参考文献可以分享一下话也会十分感谢的，谢谢大家！期待回贴呀！！！！洛阳双螺旋 queeniee wrote:有木有做细胞的同学可以出来指导一下呀？要做鸡肝脏的体外细胞实验，需要研究激素对肝 ...

adigao 由于我是药剂专业的，转染不是很熟悉，但是想用表达荧光的U87或者C6细胞做实验，哪位知道什么地方有卖的呢？或者能够定制呢？不胜感激！芭比妥酸 问问协和细胞中心，我只知道普通u87是700元adigao 普通的细胞有的，但是都没有荧光标记的aberrant adigao wrote:普通的细胞有的，但是都没有荧光标记的这2个都是胶质细胞系，瞬转也不很容易，挑稳转的话难度更大，不知道你是出于什么目的需要GFP或luci ...

wen-wen 实验组：将带有c-myc和UT-B的pcDNA3.0质粒转染到MDCK细胞当中对照组：1、将带有c-Myc和AQP1的pcDNA3.0质粒转染到MDCK细胞；2、将GFP的质粒（就是一个只有GFP的质粒，没有UT-B,AQP1）转染MDCK细胞中，主要目的是想看我的操作技术怎么样；3、过表达AQP1-MDCK的稳转细胞系。 然后通过免疫荧光来证实转染结果。（因为质粒若带有GFP会影响其功能，所以选择用标签染色的方 ...

zhangxiumei2005 请问：哪位做肿瘤与代谢方面课题？哪个公司的乳酸检测试剂盒比较好？急用，谢谢hooray365 biovision 这个不错啊蝈蝈001 是用来测细胞培养液中的乳酸么？shylook biovision可以检测培养液中乳糖定量的话 需要同时收细胞 消化裂解下来 测细胞个数或者蛋白浓度最后换成每1undefinedn个细胞或者每mg蛋白的乳糖含量本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你 ...

mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒，想研究某种材料的细胞毒性，看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测，结果显示材料基本无毒性。由于条件限制（流式细胞仪在我们学校另一个校区）不能及时进行检测，前两天进行了一次实验，是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理，检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态，个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关（悬浮在An ...

xjtudj 食管癌细胞EC109和Eca109是同一株细胞吗?在细胞库里看到他两有不同的资源号，搞得我迷糊了。胡图伊什 应该不是同一株最近也正在四处找食管癌细胞株的信息wangwei006114 楼主在哪做食管癌研究啊xjtudj wangwei006114 wrote:楼主在哪做食管癌研究啊学校，我还是学生。美美88 请问，现在搞清楚了吗？我也想知道有什么区别！请告知，多谢了！我的邮箱chenjm76@163.compengy0 ...

陆小疯 各位大神。本人最近开始做实验。Src inhibitor (PP2)，PLCγ1 inhibitor(U73122)，ERK1/2 inhibitor (PD98059)这几个细胞通道的抑制剂。能抑制细胞migation.文献上说是用上述某浓度的处理30min。再继续实验。但是人家文献上的细胞只培养了8到12h。而我要培养4周。想请问各位。我是要在培养液中配置上述的浓度抑制剂使用。还是就是细胞预处理。然后按照以往一样培养。但是如果 ...

mhy叶可 大家好，我是新手，第一次养细胞，恳请各位大虾给点关于培养K562以及K562/A02的建议。K562是悬浮细胞吗？还是半贴壁？半贴壁的话应该怎么换液？请各位老师不吝赐教，多谢，多谢。yupingwang 悬浮细胞，离心后去上清，培养基重悬mhy叶可 多谢，以后还要多多请教，呵呵mhy叶可 请教楼上老师，k562/A02耐药细胞株培养时，怎么维持它的耐药性，加阿霉素大约从什么剂量开始加？百迈生物 mhy叶可 wrote:请教楼上老师 ...

578475733 因最近要做蛋白激酶C在糖尿病方面的实验，求助各位高手有没有蛋白激酶C信号通路的图片，最好带注解，十分感谢。石依信念 我也想要～～～～黑胡桃 data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAskAAAGdCAYAAADgwu6RAAAgAElEQVR4Aey9B7xdxZXmu04+NypnIRQIAkkkAxIZJBDJ4ADO7qbHoZ3etO32G3 ...

暮色英雄 我是用无血清NB培养基+EGF+bFGF+B27+p/s双抗的培养基培养的胃癌原代细胞，培养基已经用0.22μm过滤器过滤除菌，但是培养细胞之后出现很多小颗粒，不知道是什么东西，这照片是昨天照的，今天再观察的时候这些小颗粒已经长满了，我师姐帮我看了说是污染，然后我把细胞倒掉了，但是她也不知道这是什么污染。希望各位大侠能帮小弟看看这到底是不是污染，是什么东西？谢谢了这是20x镜拍的ecust小熊 真菌污染吧？双抗无 ...

holiday2008 各位高手，我用LPS刺激raw264.7细胞，24h后检测TNF-a和IL-6，发现TNF-a大量释放，但IL-6却没有检测出来（试剂盒没问题）。这是怎么回事啊？主要是我去年做的时候IL-6都很高。请各位帮帮忙，谢谢了！与你无关 LZ 我也想知道啊 是不是细胞状态不对啊我的细胞是冻存了一年之后再复苏的，做不出以前的结果了。。。caesar1112 holiday2008 wrote:各位高手，我用LPS刺激raw264. ...

bahai 各位老师好，最近在做阴道壁鳞状细胞的原代培养，一直不见起色，培养不成功，情况就是没有任何细胞长出来，特来请教大家。看了好多文献，看了很多细胞培养的资料，咨询过很多同学，然后做了多次，都是没有细胞，呵呵现在有这么几个问题：1：培养基的选择：文献中都说用的是K-SFM培养基，我现在是用了K-SFM培养基和DMEM/F12两种培养基同时做，希望对比一下两种培养基的情况。结果都是没长出来，DMEM/F12时，24小时候， ...

巴巴布拉拉 本人系科研新手,丁香园新人.最近关注雷帕霉素诱导细胞自噬,很多材料上都写雷帕霉素诱导自噬是作用于mTOR引起.mTOR分为mTORC1和mTORC2.又有材料写mTORC1对雷帕霉素敏感,但与自噬关系不大,mTORC2对雷帕霉素不敏感.那雷帕霉素诱导自噬到底是作用于mTORC1呢还是mTORC2呢？想不明白这个问题，敬请诸位前辈能赐教。初次法帖，如有不妥，请版主指教。无言言无 Rapamycin-Induc ...

chenyingweixiao 急向各位战友求教：我用高脂饲料喂养C57小鼠10周后，WB检测小鼠脂肪组织p-AKT水平，结果显示与普通饮食小鼠相比是升高的，但是文献上报导的是降低的啊，这是怎么回事呢ourlab 在样品获得的过程中pakt迅速被去磷酸化。随着时间延迟，pakt水平越低。你如果在处理两种小鼠以获取样品所用的时间不同，pakt水平就不能反映真实状况。所以应以尽量短的时间和尽量相同的时间获取样品。参考以下 ...

tangc233 一直在养骨髓间充质干细胞，年前出现了一次细胞污染，年后我改用进口血清，同时每次配完液（低糖DMEM+10%血清+双抗）后都用滤器过滤一下，最近发现细胞不肯长，甚至之前都贴壁生长的细胞换完液后2天大半都不见了，但还可见一些贴壁细胞（换液前后的培养液配置都是一样的），现在我也不知道问题出在哪里，还请各位高手多多指教！宋丽娟1016 我想，你可以从以下几个方面考虑：1，是不是你的双抗浓度太高了呀2你的细胞是第几 ...

honbin 由于实验条件有限，现在用某厂商试剂盒提全血中的rna，在裂解细胞的时候需要在4度离心机中2100rpm离心10分钟。请问，4度离心的目的是什么？如果不在4度中离心，结果会出现怎样的偏差？请高手帮忙解答，谢谢。selleckchem01 低温离心主要是为了降低RNAse的活性，防止RNA被降解honbin selleckchem01 wrote:低温离心主要是为了降低RNAse的活性，防止RNA被降解好的。非常感谢 ...

batton 转入细胞的可见FAM标记的绿荧光，不过本人有一点搞不懂，可能有一些是没有转进细胞的，为什么细胞外就看不到荧光呢？吴佰霖 能不能这样理解，进入细胞后就具有了聚集的作用，分散在培养基中就不明显了ouyi2738 你好，我想问一下你每次转染后多长时间观察，还有用的miRNA mimic的量是多少啊，我稀释到20mM,每次转2ul，也就是200pM，可是在倒置荧光显微镜下观察到的荧光很弱@batton。谢谢！lvhen5 ...