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        【求助】求助:GFP或者萤光素酶稳定表达的U87或者C6细胞

        丁香园论坛

        1955
        由于我是药剂专业的,转染不是很熟悉,但是想用表达荧光的U87或者C6细胞做实验,哪位知道什么地方有卖的呢?或者能够定制呢?不胜感激!
        问问协和细胞中心,我只知道普通u87是700元
        普通的细胞有的,但是都没有荧光标记的
        adigao wrote:
        普通的细胞有的,但是都没有荧光标记的

        这2个都是胶质细胞系,瞬转也不很容易,挑稳转的话难度更大,不知道你是出于什么目的需要GFP或luciferase稳转?如果仅仅是为了标记的话,可考虑其他的活细胞染料。
        aberrant wrote:
        这2个都是胶质细胞系,瞬转也不很容易,挑稳转的话难度更大,不知道你是出于什么目的需要GFP或luciferase稳转?如果仅仅是为了标记的话,可考虑其他的活细胞染料。
        我想观察我的药物递送系统对胶质瘤的靶向性,通过荧光共定位更能够说明问题,担心通过其他染料标记的话,在体内接种肿瘤细胞后,随着细胞的生长,标记的细胞数目会逐渐减少
        adigao wrote:
        我想观察我的药物递送系统对胶质瘤的靶向性,通过荧光共定位更能够说明问题,担心通过其他染料标记的话,在体内接种肿瘤细胞后,随着细胞的生长,标记的细胞数目会逐渐减少
        建议使用CFSE试试看。我查了一下其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。另外,CFSE标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。荧光探针CFSE进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的荧光染色最强,并证实CFSE不影响细胞的增殖能力。
        aberrant wrote:
        建议使用CFSE试试看。我查了一下其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。另外,CFSE标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。荧光探针CFSE进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核,在细胞核的荧光染色最强,并证实CFSE不影响细胞的增殖能力。

        非常感谢!
        建议用特异性marker做免疫组化

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        师兄微信号:shixiongcoming

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