细胞技术

一、细胞培养基本概念 细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。 在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤成纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点，它在临床染色体分析中使用最广泛。体外培养细胞株可在培养 ...

细胞培养用的筛网的相关知识，单位的含义及其与相关单位的换算。

一、筛选之前确定G418浓度： 1、由于每种细胞对G418的敏感性不同，而且不同的厂家生产的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉剂中有效的G418含量大约为0.722g。 2、G418是新霉素的类似物，两者都是通过抑制核糖体的功能和蛋白质的合成而杀死细胞的。但是新霉素对真核细胞无作用而G418对细菌和真核细胞都起作用。neo就是编码3′磷酸转移酶的基因，它表达的蛋白能够分解新霉素和 ...

细胞培养需要注意无菌操作、实验用品等及细胞培养的简单步骤。

脂肪源干细胞的培养的准备和步骤。

第二章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES 第一节显微技术 第一节显微技术 光学显微镜：以可见光（或紫外线）为光源。 电子显微镜：以电子束为光源。 一、光学显微镜 （一）普通光学显微镜 1、构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 2、原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。 3、分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 R=0.61λ/N．A． ...

Hela细胞传代步骤 1．观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。 2．加热PBS、versene、培养基，(提前做好) 瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。 3．打开超净台（先开风机，后开照明），用75%乙醇清洁台面，点燃酒精灯。不要把废液缸拿出去倒，如果废液太多，可以用其他容器先装废液。取小离心管一个，置于架子上。 ...

细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。 细胞生物学由细胞学Cytology发展而来，Cytology是指对细胞形态（特别是染色体形态）的观察。 在我国的基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。 第一章历史与展望 HISTORY AND PERSPECTIVE 第一节细胞生物学简史 细胞生物学的历史大致可以划 ...

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培养293细胞应注意以下几个方面： 1.用1640加10%胎牛血清，有的种系用DMEM.血清要求质量较高，在普通血清中细胞生长不太好。1640用双蒸水溶解，按说明加入碳酸氢钠。 2.培养液中应加入HEPES，起缓冲pH值的作用，否则会影响细胞状态。如果用20%的HEPES，每次配培养液时每200ml培养液可加入5ml.加入HEPES后1640培养液颜色略呈橘黄色而非暗红色。 3.消化所用胰酶可选择 ...

在细胞复苏过程中，有多次复苏失败，最终在查阅了相关技术积累了足够的复苏技能后复苏成功，现将细胞复苏的操作程序和注意事项总结如下，望能为同行提供些参考。【材料】1. 常规细胞培养仪器设备、恒温水浴振荡器。2. 培养液（DMEM）胎牛血清（CBS）二甲基亚砜（DMSO）【操作程序】1. 细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min以上。2. 培养液（DME ...

细胞培养板的选择和使用

培养细胞应该养成的一些好习惯

基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应 ...

一、关于如何计算IC50 1、改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4) Xm:lg 最大剂量&nb ...

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段，同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。 但是，由于细胞因子在体内的含量甚微，给细胞因子的检测带来困维，细胞因子的检测尚未在临床诊断上广泛开展，已知目前采用的 ...

1.滤器高压消毒时滤膜变小，为什么 丁香园网友dongwp的观点为：旋紧压住膜后高压灭菌就可以了，醋酸纤维膜会收缩，尼龙膜会好点。 2.滤膜破了，真空泵惹得祸？ 丁香园网友worm27的观点为： 防细菌滤膜的网孔的直径为0.45微米以下，当溶液通过滤液后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置；液量小时，可用注射器。使用前对其高压灭菌，将滤膜装在 ...

1.针头滤器的使用 丁香园网友heyj的观点为：用滤膜孔径为0.22um的一次性针头滤器过滤胰酶，一次可以过滤100ml。如果想一次性过滤完可以准备1-2个备用的。注意在配胰酶溶液时尽量完全溶解，否则未溶的颗粒会堵住滤孔影响过滤速度。本人认为过滤效果与滤过的液体量无关。 丁香园网友ssl3304的观点为：过滤0.25的胰酶，一次可以滤1L，没有问题的，培养基最多300-400ml，总之一定要充分溶 ...

1.小过滤器如何清洗 丁香园网友bnucell的观点为：先用针管反复抽吸蒸馏水，之后超声20分钟左右，最后用蒸馏水浸泡5个小时以上，取出，40度左右烘干即可。其中的垫圈不要烘，自然晾干就可以了。 丁香园网友飘泊的观点为：小滤器使用后的清洗、消毒和其它可高压的塑料制品（聚丙烯、聚酯和聚偏二氯乙烯等等）一样，但聚乙烯不能高压。A. 流水反复冲十遍，干燥（高压时的温度是多少？之后还得干燥，垫圈我们同样拿 ...

1.不锈钢正压滤器 丁香园网友zhyjd的观点为：买不锈钢正压器时，看看厂家是否给带气囊，如果带就没有必要买了，其实买膜的地方他都会有不锈钢正压器的，滤器先要洗干净，装好滤膜，包装起来高压后，在超净工作台上操作。 2.玻璃滤器 多年前（80年代）刚开始做细胞培养时，使用的是G6型玻璃滤器用于除菌过滤培养液，使用前必须经过泡酸，自来水清洗，蒸馏水过滤，然后再包装，高压灭菌后用于过滤培养液。 3.过 ...