• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        293-T细胞培养的注意事项

        互联网

        8562

        培养293细胞应注意以下几个方面:

        1.用1640加10%胎牛血清,有的种系用DMEM.血清要求质量较高,在普通血清中细胞生长不太好。1640用双蒸水溶解,按说明加入碳酸氢钠。

        2.培养液中应加入HEPES,起缓冲pH值的作用,否则会影响细胞状态。如果用20%的HEPES,每次配培养液时每200ml培养液可加入5ml.加入HEPES后1640培养液颜色略呈橘黄色而非暗红色。

        3.消化所用胰酶可选择0.125%浓度,且不要消化时间太长。也有研究者认为不用胰酶,直接吹打使细胞脱壁,但使用胰酶效果较好。消化时在镜下观察到细胞形态稍有变化即可,不要等形态明显变化后再停止。可以不用加血清终止消化,只要将胰酶倒出来,加上培养液吹打即可。

        4.传代密度不宜过高也不易过低,一般1瓶传3瓶可能比较合适。

        5.培养液应该适当偏酸性,在7.0-7.2之间比较好。一般加上HEPES后,pH值是不用调的。

        6.细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。

        7.传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序