细胞技术

M110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生damdcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响 ...

动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。 批式操作是动物细胞规模培养进程中较早期采用的方式，也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物反应器，将细胞扩大培养后，一次性转入生物反应器内进行培养，在培 ...

物理方法电穿孔(electroporition)显微注射(microinjection)化学方法磷酸钙转染(calcium phosphate transfection)脂质体转染(lipofectin transfection)DEAE葡聚糖介导转染(DEAE dextran-mediated transfection)目前比较常用的方法是脂质体转染，以下我简单介绍一下：转染试剂：Lipofec ...

植物组织培养（ Plant tissue culture ）技术，是 20 世纪兴起的一项植物细胞工程技术。它的基本内容是：从外界植物体上取下任意的一个到几个细胞或者一块组织在全人工的离体条件下进行培养，经过细胞或者组织的分裂、分化及几何增殖达到植株的形态重建和快速繁殖的目的。植物细胞具有全能性，即任何一个植物细胞都具有形成该植物体的能力。换言之，任何一个高度分化的细胞都具有回复到原始未分化细胞的 ...

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测 　　根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。　　1 ...

一、细胞培养基础问答 1.BHK细胞就是指BHK21吗？答：BHK细胞是指幼年叙利亚地鼠肾细胞（Baby Hamster Syrian Kidney），1961年建株。原始的细胞株是成纤维细胞，贴壁依赖性。1963年获得单细胞克隆细胞。后经无数次传代后细胞可悬浮生长，它广泛用于增殖各种病毒，生产兽用疫苗。 最常用的是BHK21的一个亚克隆细胞，即克隆13或C13 。2.二倍体细胞有什么特点？答：二 ...

3.2 加温对支原体污染的治疗效果:经观察发现加温8h后荧光小点开始变少。16h细胞周围支原体几乎消失。进入24h开始细胞周围的荧光小点完全消失但细胞开始逐渐变圆。脱落飞48h大部分细胞已完全变圆细胞正常形态消失培养基中出现飘浮死亡细胞。 　　 　　3.3 多西环素、环丙沙星联合治疗支原体的效果:30μg/ml组和50μg/ml组多西环素和环丙沙星作用细胞24h开始荧光开始减少36h仅 ...

1.固定化动物细胞大规模培养技术2.动物细胞的灌注养方法3.动物细胞无血清培养技术4.动物细胞培养生物反应器前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年其规模开始扩大发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50%。动物细胞大 ...

一、在细胞生物学方面的应用通过细胞培养，可使离体组织细胞在体外能以单细胞和细胞群体的形式进行生长繁殖，这不仅有利于在比较简单的容易观察的条件下研究细胞的形态结构和生理功能，而且可以采用特殊的培养方法和观察手段研究不同细胞特有的功能和生命现象，如细胞转化、诱导分化、细胞融合杂交，细胞对不同病毒、不同药物和不同理化因素的敏感性，不同细胞在不同环境中所表现出的不同功能，如细胞因子分泌、吞噬和杀伤效应，这 ...

磷酸钙转染磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被转染的DNA可以整合到靶细胞的染色体中从而产生有不同基因型和表型的稳定克隆。这种方法首先由Graham和van der Ebb使用，后由Wigler修改而成。可广泛用于转染许多不同类型的细胞，不但适用于 ...

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE ...

1．挑取-20℃保存的DH5а单菌落接种于3ml的LB液体培养基中，37℃160r/min培养过夜（此为一级培养）2．将一级培养菌液接2%的量接种于5ml新鲜LB液体培养基中，37℃，200r/min培养2.5~3.0h，使细菌进入对数生长期。（OD600=0.6左右）3．将二级培养产物分装到1.5ml离心管，冰浴30min.4. 4000r/min离心10min弃上清。5．加750ul0 ...

方法1、抗体测定：研究对象取200μl新鲜抗凝全血，每管100μl加入流式细胞仪检测管中，再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心，弃上清液，磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline PBS)洗细胞两次，其中反应管加入鼠抗人HLA-undefined02抗体××μl（达科为公司），4℃ 30min孵育后，PBS再次洗细胞，每管加入PE标记羊抗鼠免疫球蛋白2μl ...

配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride 10x Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl 80 gb) KHCO3 10 gc) Na2EDTA 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中;2. 加去离子水定容到10 ...

（1）组织准备：大鼠以10%水合氯醛（0.3ml/100g 体重），或1%戊巴比妥钠约1ml（3～4mg/100g体重）腹腔内注射麻醉，用100ml生理盐水冲洗和150ml 4%多聚甲醛主动脉灌注固定。固定半小时后〕鲎橹椋萌?%多聚甲醛液中后固定4～6h，4℃。　　如要取脑组织，可于灌注后置4℃冰箱内过夜，次晨取脑组织，后固定4℃4h左右。　　（2）组织切片/培养细胞在经过处理，抹以粘附剂的 ...

progress on Study of Techniques for Expansion of Human Hematopoietic Stem Cells　　chem Yongle1Ling Weijun2Peng Dongxian 1(1.Zhujiang Hospital The First Military Military medical Uniuersity.Guangzhou 51 ...

基金项目:本课题受国家“九五”重点攻关课题（96-960A-01-20）和黑龙江省重点攻关课题（G00C190401）资助【摘要】 目的 研究多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外细胞因子激活的NK细胞的支持作用。方法 分别用AIMV及完全培养基培养粘附NK细胞（A-NK）和非粘附NK细胞（NA-NK），比较细胞的增殖能力、杀伤肿瘤细胞的能力、表达粘附分子CD11 c 的能力，并通过电镜 ...

序号 化合物名称 含量 (mg/L) 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 1 ...

美国佛罗里达中央大学的微生物学教授KeithIreton的科研小组发现了致死性食源性细菌一个先前未被了解的的传播机制。 李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）是一种细菌。它会导致怀孕妇女流产，在老年人和免疫系统损伤人群中引起脑膜炎。2002年在美国多个州就爆发了利斯特氏菌病。 ...

1、细胞(cell)细胞是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成 是生物体的结构和功能的基本单位 也是生命活动的基本单位。细胞能够通过分裂而增殖，是生物体个体发育和系统发育的基础。细胞或是独立的作为生命单位 或是多个细胞组成细胞群体或组织、或器官和机体；细胞还能够进行分裂和繁殖；细胞是遗传的基本单位，并具有遗传的全能性。2、细胞质(cell plasma)是细胞内除核以外的原生质 即细胞中细 ...