细胞技术

细胞培养技术中，细胞计数是一项基本功，对于标准化培养条件以及需要精确定量的实验来说都非常关键。这里介绍使用血细胞计数器对细胞进行计数的经典方法以及中间一些需要注意的细节。制备细胞悬液：对于贴壁生长的细胞，我们需要首先使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落根据需要加入合适体积的培养基，将细胞进行中和及稀释，以得到均质的细胞悬液。要求尽可能将细胞吹打散开，不要残留任何细胞团准备血细胞计数器：使用70%乙醇将盖玻 ...

1. 如何降低背景流式细胞实验优化过程中的一个关键步骤是试剂（抗体）的滴定。为了达到最佳效果，实验者必须确定抗原结合达到饱和所需抗体的最低量。这将帮助实验者提高荧光信号特异性和强度，同时尽量降低背景。如果需要同时使用多色时，滴定这一步骤也可以让实验者发现一抗和二抗之间意想不到的交叉反应。2. 如何选择对照Mouse IgG2a Isotype Control Fluorescein 010-0241千万记得设置与标记抗体同型的阴性对照， ...

PromoCell MSCDXF培养墓的主要特点：1、适用于骨髓/脐带/脂肪来源的MSC；2、在更短的培养时间内细胞扩增更多；3、细胞倍增速度更快；4、操作简便，基础培养基和补充剂一次性混合后，即可实现培养；5、更低的接种密度， 4000个细胞/cm2；6、在细胞传代的整个过程中，都可维持免疫表型、多能性及对T细胞的抑制能力；7、无血清、无动物源性，成分已知。优点：1、精确控制MSC的类型，自我增值或定向分化2、更低的使用成本3、降低 ...

准备：无菌手术器械，75%乙醇，0.25%胰酶，0.2% dispase酶，0.2% 胶原酶，胎鼠或初生小鼠步骤：1、将小鼠浸于75%乙醇中消毒5min；2、转移至超净工作台中，背部朝上固定四肢；3、用剪刀剪下背部皮肤（注意：不要剪到皮下肌肉组织）；4、刮除皮下多余组织（注意：不要刮得太厉害）；5、将皮肤剪成宽约3mm的条状，表皮朝上平铺于平皿中；6、加入0.2%的dispase（加入的量以使皮肤漂浮起为宜）；7、将上述皮肤组织于37℃中处理1. ...

PromoCell的人类心肌细胞（HCM）分@自成人心B的心室。该组织来源于正在进行心脏移植的患者的外植心脏。a）当一T大V本的心肌进行了灌注和4完全消化-，会分@bcdf的心肌 细胞。gh一i细胞会自发进行常n的p缩，sgt一iu只w受cy激-才会p缩。由于gp缩功能，它们通常能用于生理研究。然s，wn律的肌节排布，会阻止大多数的细胞附着cTC培,皿上，因此，t们在体外是无法生长的。b）s另外一9情况下，当成人心肌进行的 ...

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胎牛血清是细胞培养常用的添加物， 目前享有盛誉的Life等国际品牌的最好胎牛血清价格飞涨，500ML从原来的3000-4000元涨到现在7000-8000元，给很多科研单位或机构造成了巨大的压力，不管是科研单位还是经销商都费劲心机储备高质量的国际进口血清。然而前期储备的较低价格的进口血清总有用完的一天， 因此国内相关单位非常关注寻求新型的细胞培养基。 但并不是所有的细胞培养需要最高质量的胎牛血清， 而且市场上有些培养基完全 ...

1. 实验动物产蛋期母鸡（动物实验中心购买），普通饲料喂养，自由进食进饮；实验前禁食12h2.主要试剂及仪器EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司；双抗购自Hyclone公司；M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico公司；CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司3.实验步骤A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na（W/V，2%）溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡 ...

细胞凋亡（英语：apoptosis，源自希腊语：απόπτωσις，有堕落，死亡之意），为一种细胞程序性死亡。相对于细胞坏死（necrosis），细胞凋亡是细胞主动实施的。细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。而细胞坏死则主要为缺氧造成，两者可以很容易通过观察区分开来。在细胞凋亡过程中，细胞缩小，DNA被核酸内切酶降解成180bp-200bp片段属于有层次之断裂，（可以通过凝胶电泳证明），而细胞坏死时，细胞肿胀，细胞膜被破坏 ...

TFAR19（PDCD5）是由本研究室在国际上首先报导的一个拥有自己知识产权的人类新基因，前期的功能研究表明，它是促进细胞凋亡的增强剂。利用荧光素（FITC）标记的TFAR19单克隆抗体为探针，对细胞凋亡过程中TFAR19蛋白的表达水平及定位研究发现，凋亡早期TFAR19表达水平增高并出现快速核转位现象，伴随着细胞核形态学的变化，持续较长时间，在凋亡小体中仍然可见。同时我们发现，凋亡早期TFAR19蛋白的核转位 ...

学霸精选：2014年十大突破技术之可控制记忆的光遗传技术：光遗传视频本视频来自互联网

流式细胞仪收集细胞产生的各种电讯号，最终以数字及图式形式表示。每种讯号（除外前向散射光信号）都包括峰值脉冲信号和面积脉冲信号两种。峰值脉冲信号指的是脉冲的高度；面积脉冲信号指的是电压脉冲曲线内区域的大小。一、参数流式细胞仪的数据参数是指仪器采集的用于分析的信号，包括：1.前向散射光（线性、对数）FS反映颗粒的大小。2.侧向散射光（线性、对数）SS反映颗粒内部结构复杂程度、表面的光滑程度。……点击查看：bbs.med66.c ...

第一就是要稀释。我们要留血浆（肝素钠抗凝的采血管采的血，5～6ml），所以分离、取出血浆后加入和红细胞等体积的生理盐水，一般3ml左右，混匀。第二，分离液不在乎体积有多少，主要是高度，如果离心管很粗的话（呵呵，挺吃亏的），就要多加一些，细一点的离心管就可以少加一些，一般高度要超过3cm。第三，看你要分离的血是什么来源的，成人外周血比较好分，脐血和胎盘血不好分。当然，发生溶血和凝血的话就更难分了。第四，血的保存很重要，采血后不 ...

科研和医学研究工作者们在论文发表，科研成果展示中往往需要若干张涵领总意的插图，而生物医学领域从业人员通常对于平面设计软件所知甚微，那么精美插图对于科研、医学工作者来说，无疑是一道很难逾越的鸿沟。在国外学术交流、研究成果交流会议中，国外学者往往用若干张简洁精美的插图便能清晰地展示内容，国际知名期刊也越发要求投稿文章需要配上插图的大环境下，难道就没有一些简单而富有成效的方法帮助解决如此难题吗？今天，我们利用一款平 ...

Foxp3是控制Treg细胞发育和功能的关键转录因子之一，它的发现是Treg免疫生物学重要的进步，为人们进一步了解Treg功能和作用机制打开了一扇“门”。虽然人们也发现Treg发育和功能也需要其他转录因子如AhR和STAT5的参与，但是Foxp3仍旧是Treg细胞系的主要调节因子。实验表明，在体外或体内诱导初始T细胞表达FoxP3后可以出现Treg样的免疫抑制作用，表明Foxp3是控制免疫抑制分子表达的关 ...

（一）药物对肿瘤细胞的抑制效应的MTT法：用培养基将肿瘤细胞调整至2 X108个/L，在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜。次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组，设加完全培养基不加药物的阴性对照，并用功能明确的药物为阳性对照和0.5%的乙醇溶剂对照。每组均设4-6个复孔（平行孔）、37℃、5% CO2继续培养。培养至12h、24h、48h、实验终止前4-6h加入10ulMTT（5g/L），培 ...

一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养，即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂，这两种物质能提高细 ...

细胞凋亡（Apoptosis），又称细胞程序性死亡（PCD: Programmed Cell Death），是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的，高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间，但由于它在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键角色，对个体的正常发育及细胞凋亡紊乱在病理学研究中的重要作用，引起了人们对其机制和组分的广泛而深入 ...

从二维到三维体内细胞生活在三维环境中。细胞在三维环境中与周围的细胞外基质、其它细胞相互作用，接受各种信号，指导其增殖、分化或迁移等行为。由于生物体的复杂性及技术的限制，多年来人们对细胞行为的研究通常是把细胞从整体中分离，研究其在二维环境中的行为和功能，从而得到对细胞的基本认识。但在二维培养体系下，细胞的形态、分化、细胞与基质间的相互作用以及细胞与细胞间的相互作用与体内生理条件下细胞的行为存在明显差异。近年越来越 ...

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样，你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？请看丁香园资深站友总结的「细胞培养板的选择」。细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U 型和V 型）；培养孔的孔数有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有 Terasaki 板和普通细胞 ...