细胞技术

00501101 1、再做NF-kB的时候不少文章用阳性对照大部分用TNF或LPS，有些不用。弱弱问下，为什么要设立阳性对照？怎么样合理去设立阳性对照？我做的实验怀疑疾病可能与内毒素有关，是否只是设一个LPS的阳性对照就好了，还是不设也可以？2、TransAMTM 是否可以完全代替EMSA？还是他们两个是互补?我看到大部分文献还是用EMSA多。3、这个问题，不好意思，我还在查文献，就是怎么样可以查出和确定NF-kB哪个结构 ...

秋风夜雨中的行人 有什么心得交流一下。是否在动脉内皮上只表达Nothc1及它的配体：DLL1？另外那位师兄师姐还有Notch1及DLL1的抗体，能否便宜买给我？秋风夜雨中的行人 怎么没有人回应呢?lele20070908 我也在做此信号研究交流一下,QQ: 85714585,晚上上网20点后秋风夜雨中的行人 好的,我加你秋风夜雨中的行人 怎么没有人回应抗体呢?samhusam 也许NOTCH4 和DLL4表达，且更重要yin198716 我现在做 ...

nydljl 最近在做高糖诱导心肌细胞凋亡，多数文献提示用其它糖对照，渗透压不是主要的凋亡诱因。那么胞外的葡萄糖是怎样通过胞膜，哪些特异的通路起作用（培养中没有胰岛素），产生oxidative stress，AGE损害等，诱导ROS，线粒体等导致凋亡？我找的很多文献基本是在下游的机制，具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作，指教指教。shqling Can I ask you a quest ...

yirenzhe ERK1与ERK2到底有什么区别？除分子量不同外。doctormy ERK1 和 ERK2 的区别是个很大的研究课题，还有很多未知啊，呵呵目前研究认为，ERK1 和ERK2 的上游激活路径高度相似，而且他们目前已知的下游靶点也非常一致。但当前有关区别的研究主要还是侧重于具体的生物学功能方面：人们发现ERK2与人体发育密切相关，对于学习和记忆的功能非常重要，而ERK1则不然；有学者认为，对于一些脊椎动物而言，ERk1非生 ...

tangqj 谁有TGF-beta的信号传导图？谢谢kaige88 参见如下：kaige88 参见如下：本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

liusurong00 各位师兄师姐好：我所做的基因的mRNA的长度为5371bp,能否让公司合成引物，然后再通过PCR得到基因全长。这样能否实现？如果不能，怎样才能得到基因序列？请各位高手指教。谢谢！westernblotx 长的mRNA的确无论从RNA提取的完整性、反转录上来说都是不小的难度。建议你分段扩增，然后用“桥接”法扩增出完整的cDNA。现在有的公司推出有长程扩增的PCR试剂，但是我没有用过，不知道扩增数千b ...

allforcell 抑制的亚型都一样吗？一般大家都用哪个？谢谢wanghongquan Wortmannin是一种常用的phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)抑制剂。Wortmannin可以通透细胞，和PI3K的110kD催化亚基相结合，特异性抑制PI3K，抑制PI3K/Akt信号途径，包括常见的抑制Akt磷酸化等。同时 Wortmannin也可以抑制myosin light chain kinase等 ...

ZHJOSHUA PI3K在不同的肿瘤细胞的量不一样的.有文献报道，PI3K的下游分子mTOR在几种常见肿瘤（卵巢癌、肺癌、直肠癌、 淋巴瘤、乳腺癌 、前列腺癌、 脑癌、黑色素瘤）中的量不同的，卵巢癌最高，黑色素瘤最低。想知道PI3K在常见肿瘤中的量的区别？哪个肿瘤最高？哪个肿瘤最低？请各位大侠给点建议，请教各位了，先谢了。ZHJOSHUA 有哪位能给点帮助吗?给点这方面的信息,相关的文献也行.谢谢了,因为接着要这样做,比较急。ZHJOSH ...

lili_jie 对信号转导途径缺乏系统的了解，特别想了解线粒体途径诱导细胞凋亡与信号转导途径的关系。麻烦知道的高手介绍一下。谢谢！轩辕之客 我也想了解这方面的知识，就顶一下！！囧～ 菜鸟同求！浩如烟海的信号转导类文献何时是个头儿啊……本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

烟花三月 除了用western blotting检测AKT和p－AKT以外，还有什么其他方法吗？谢谢！doctormy 其余的方法还有流式细胞仪、细胞免疫荧光（免疫细胞化学）、免疫组化等。需要说明的是，一定要根据实验目的和方法来买相关的抗体，曾经有个同学想做免疫组化，但却没认真去查文献资料，就草草订购了抗体，结果买回来才发现其买的类型不适合做组化，白浪费了两个多月。附细胞免疫荧光的图片：daikey_xie supperarray ...

00501101 最近按照老板的要求在琢磨开题最近老板提出，经过刺激的巨噬细胞，引起了NF－kB的活化（活化我做过了）。能不能看一下，活化的NF－kB究竟引起的哪些基因的激活或者抑制。求教各位大虾，不知道这个想法能不能做？如果能做，谁知道怎么做不？能不能给提供些相关的文献。我自己也在积极寻找此类的文献。doctormy 你的想法可以去做，但这方面已经有了较多的研究，你一定要有所创新。通常应该将NF-kB、巨噬细胞和某一疾病或 ...

ZHJOSHUA 请问PI3K激活度,量,基因表达水平这三者是什么关系啊?通过PCR可以检测PI3K的基因表达水平,那激活度和量怎么样来检测呢?谢谢ZHJOSHUA PI3K的激活度与量到底是什么样的关系呢?ZHJOSHUA 就没有哪位大侠能给点提示?ZHJOSHUA 就没人顶一下?ZHJOSHUA PI3K是有这三个不同的水平的说法吧?本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师 ...

darhin1206 我们组需要大量的做过GPCR 的战友。但招聘广告发去很久 未能找到专门作这个的。现求助各位战友告知哪些科研院所在做GPCR？？PS：本公司是张江药谷很大的CRO企业。。。ggester 是做GPCR那个方面的，功能还是表达？你们是准备招人还是合作？nopain 我现在做的就是GPCRzhangcy2004 我们组主要就是做GPCR。z1 你们都是哪个研究机构，也不说说~~~~ggester 没想到这么多做GPCR的阿,大家都 ...

wuxin_1999 很疑惑的一个现象，我在检测细胞内pErk的水平，但是western做出来的条带怎么有时候是两条带有时候是一条带？pErk1/2的表达和细胞培养条件有怎样的关系呢？哪位给些建议啊littleniu 一般ERK1的条带比ERK2要弱一点，所以如果你样品没做好或者胶没跑好，上面一条带就可能没有的，只要细胞状态好，ERK表达都很强的，选好你细胞所需的培养条件就可以。shqling 1、提取蛋白时一定要迅速，以 ...

liyoukong 请问这里有没有人研究肾纤维化中上皮细胞间充质转分化的（Epithelial-mesenchymal transition，EMT），有些问题想跟大家深入讨论一下！（也许帖子放的板块不是很正确，不过如果放到临床版块去的话就很少有人会关注这样的基础研究，所以考虑再三还是把这个帖子放到这个版块来了，请见谅！）首先我们知道肾小管上皮细胞EMT是肾纤维化发生发展的重要步骤和中心环节，阻断甚至逆转EMT可以非 ...

joya58 想请教大虾们一个问题，我准备定p38mapk的磷酸化抑制剂，看有SB202190和SB203580两种，文献上都有用，但是不知道有什么区别，该如何选择？还有从哪家公司购买比较好？calbiochem?丁香通 建议到丁香通发布求购信息1、信息可持续保留，不会像bbs帖子这样容易沉下去2、发布求购信息，有机会赢取千元大奖，每月都有中奖机会，详见：你求购，我买单活动3、你的求购信息被分门别类保存，并且可以迅速地被检 ...

yaoyiren11 本人想做药物对于肿瘤细胞本身分泌的细胞因子的影响，但是并不是所有肿瘤细胞都能分泌很多细胞因子，因此想让高人推荐几种能自身分泌较大量细胞因子的肿瘤细胞系，或者瘤株，以便于ELISA检测出来。静候指点，谢谢！cameronly 你好，请问，您现在找到这种可以分泌多种细胞因子的瘤细胞株了吗？因为我现在也在做细胞因子的研究，麻烦帮忙一下，主要是可以分泌IL-1，IL-6，TNF就可以，谢谢luke_zhang ...

lsjlm 本人从PubMed 上检索到一篇题为 Notch signaling in osteoblasts.的文献，可是下载不到原文，请高手指点！万分感谢！lsjlm 本人从PubMed 上检索到一篇题为 Notch signaling in osteoblasts.的文献，可是下载不到原文，请高手指点！万分感谢！ 邮箱lsj365@163.comxdb86 求助文献请到检索SOS版http://www.dxy.cn/bbs/post/page?bid=208&sty=1 ...

hbqh 我给大鼠腹腔注射PDTC后，大鼠出现烦躁，有几只还出现抽搐，死了几只，不知道是什么原因，哪位前辈知道啊，在线等hbqh 没有人知道啊，自己顶一下，伽利略 烦躁是肯定的，对中枢系统有影响，你的浓度可能偏高，稀释一些伽利略 烦躁是肯定的，对中枢系统有影响，你的浓度可能偏高，稀释一些本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

dyy9868 大家好！我的试验是做wnt通路。最近遇到了一些困惑和实验技术上的一些问题，恳请大家帮忙。1、我用western blot分别检测了beta-catenin在细胞中总蛋白、包浆蛋白和核蛋白的变化，药物处理后都有所降低，当时出现阳性结果后，很高兴，但一直没有及时总结试验结果。现在想写章时却发现结果很乱，如果都写进去，需要讨论的面就太广了啊。胞浆蛋白beta-catenin降低就说明降解增多，进入核减少（这点已由 ...