细胞技术

xueruo 你好，本人要做IKK-NF-κB通路方面的研究，做的是胃上皮细胞，指导导师让我用NBD抑制IKK活性，并要求我订购IKKβ磷酸化抗体做IKK活性试验，我有点困惑，查了不少的文献，IKK都是引起IκB磷酸化激活NF-κB的，而非IKK磷酸化激活的，其中的原理是什么?NBD多肽我在文献上看到有野生型，突变型，好多文献里NBD多肽是找公司合成的，肽链有长有短，打电话问公司订，他们要求我提供序列，我也不知道提供什么 ...

ydj19830 Nature：阿尔茨海默病发病机制研究专题：Nature报道美国加州Genentech公司研发部和Salk研究院分子神经生物学实验室的研究人员在大脑神经连接发育研究项目上取得最新的进展。相关成果公布最新的Nature在线版上，文章揭示了神经连接发育的机制，其中Caspase在其中发挥重要作用。在大脑的神经连接发育过程中，自然地会发生轴突分支与神经元凋亡的事件，这些事件有助神经连接发育，然而，为 ...

sunyong_97 我先简单汇报一下实验内容：我想研究某一刺激因素上调粘蛋白的信号通路，准确的说就是找到哪一条即可，不需要深入研究。我的思路如下：1，加入刺激因素后，让rt－pcr和wb证明粘蛋白表达增加。2，文献检索得知，粘蛋白主要有3条通路3，加入刺激因素后，分别检测3条通路中标志蛋白是否升高，升高的即可能 为通路；然后在这条可能的通路中加阻断剂，看是否阻断；这样即可找到通路。4，或者，第三条不要，直接到4，加入刺激因素后 ...

nulidaodi 我做的课题需要用脂多糖来激活MAPK通路，并且分别在激活5m，10m，15m，30m，60m后检测，加入脂多糖的时候应该是在无菌操作台中操作，因为外面空气中有细菌，也就是说有脂多糖，会影响实验结果，在加入脂多糖后，时间点到了，比如说已经到了5m或10m，这时候该如何终止反应呢？用生理盐水清洗然后加入细胞裂解液裂解细胞，是这样地吗？那么这个过程在什么环境中操作呢?如果加入脂多糖到了时间点后就把培养皿 ...

feroger 请问在平滑肌细胞增殖信号通路中，NF-KB、EKR、PI3K三条通路是并列的吗？还是NF-KB是EKR、PI3K其中一个的下游信号通路？谢谢yhwangcams 这个问题？有点......还是多看看文献，建议先看综述。feroger 我就是看了文献后才糊涂的，有的说3条并列，有的说NF-KB是EKR的下游靶点，更多的说NF-KB是PI3K的下游靶点。刚刚接触这方面的信号通路，望多指教，谢谢！yhwangcams 呵呵，好多 ...

hmucn 请问AICAR用什么溶解还能保持其活性，我试用水溶可是不能溶解，用DMSO能够溶解可是又影响其活性。另外，请教hypoxanthine是不是也只能用DMSO溶解，可是再用xanthine oxidase反应预使其产生超氧，可是有时就没有效果，请问有谁能够帮助提供二者反映的最佳条件吗？谢谢了！！！doctormy AICAR应该现用现配，其在水中的溶解度大约为7 mg/mL。你可能配的浓度太大了。至于hypoxant ...

真水无香2009 Notch信号在诱导干细胞分化NK细胞中的作用，是最近工作中比较急需的。相关文献好像并不多，而且有的文献并不提供全文，有没有这方面的达人可以提供些相关文献或相关知识？先谢了。真水无香2009 MS没人理。郁闷ing。。。。。。莘橙 我也想知道Notch信号与干细胞之间的关系，但主要是心脏方面的本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：sh ...

tuyuan 我马上改开题了，老板让做家蝇信号通路，就是模仿果蝇的方法做toll通路。但很难找到特异性抑制剂，想在蛋白和基因两方面看通路阻断或诱导前后蛋白等变化，希望高手指点指点。不甚感谢！xxg216 你好：我们是做TOLL通路的 ，也是准备阻断这个受体，观察一些变化的，可以使用中和抗体将其阻断，人，小鼠的比较好找，美国eBioscienc公司就有，我们使用大鼠的，寻找了好久才找到，是ABCAM公司的TLR4 antibody - A ...

ilzmx 我的方法是将人正常肝细胞(买的细胞株)在六孔板内的盖玻片上，待长满融合后，在六孔板内操作，用PBS洗三次，加0.05% lucifer yellow染料1ML,然后用手术刀片在玻片上划痕,放回培养箱内孵育5-8分钟(3分钟也试过),然后PBS洗2-3次,取出盖玻片在荧光显微镜下观察,细胞未经任何处理,染料传输情况很不理想,我在文献中查到正常细胞应该能传到离划痕4-5层才对,为什么我的做出来没有传输,图我贴上来了,不知是 ...

yinshine STAT3的细胞定位，及与氧化应激、凋亡的关系是什么啊，望各位指点，越详细越好；还有啊，Ref-1具体是什么东西啊，定位哪里，它与氧化应激、凋亡的关系是什么呢。谢谢doctormy 回答你的第一个问题：STAT3通常被认定为是促进组织细胞抗凋亡效应的，因此，较多研究将其视为肿瘤治疗的靶点之一。氧化应激通常会激活STAT3信号通路，从而导致抗凋亡效应，进而发挥保护组织细胞的效应。关于STAT3的细胞定位，见 ...

8218lijing 如题：请教各位ROS自身的信号通路。想要阻断其信号通路，有什么试剂？谢谢诸位！8218lijing 有做这方面的战友吗？doctormy 主要研究过ROS与凋亡的关系（如下图）阻断试剂中最常用的是NAC、catalase。应用NAC预处理即可在一定程度上清除刺激因素导致的细胞生成的ROS理论上，在培养中加入catalase即可降低ROS水平。8218lijing 非常感谢！要清除培养上清中的ROS用什么 ...

莲芯 请各位高人指点，在RhoA-ROCK信号通路中，如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢,并且ROCk是如何参与细胞运动的．十分感谢！急呀！dianaofyezi 可以购买相应的试剂盒进行检测活化后的RHO-A蛋白。doctormy "如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢"，如果我没理解错的话，你的意思是解释和分析，这是试验设计的基本问题，只有结合你的课题具体思路去设计解释。关于ROCk是如何参与细胞运动的，相关文章太多了 ...

清茶小狗 信号通路和信号转导有区别吗?谢谢!时光转角处 没区别wy063000 略有差别，信号转导包括配体-膜受体-信号通路-核受体-蛋白一系列事件zhangtx08 没什么区别吧本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

liudengchang 大家好，有谁用过Bioworld Technology 生产的p-STAT3 （Y705） antibody 或p-STAT3 （S727） antibody 做Western和免疫细胞化学效果怎样？谢谢磷酸化抗体 您好，我公司有p-STAT3 （Y705）抗体，请看下面链接：http://www.zkbiotech.com/products_show.asp?id=126联系：495182841@qq.comchuckdouble liud ...

医生和球 看的文献较少，自己知道的只有wnt、PTEN等，请问还有哪些通路与β-catenin有关，有无类似的综述？谢谢！狐狸renart 只知道wntchuckdouble The canonical Wnt/beta-catenin signalling pathway.Barker N.Methods Mol Biol. 2008;468:5-15. Review.PMID: 19099242或许你已经念过这个论文本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的 ...

immu_zr 各位高手，我想请教一下，造血系统特异性表达的启动子有哪一些？我想要设计一个转基因小鼠，将某个基因在造血系统中特异性高表达，不知道该如何选择合适的组织特异性启动子，请各位指教，谢谢！zhuyufengluohong tec启动子immu_zr 非常感谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

zhuangzongdxy 动物实验脑室注射IGF-1激动PI3K-AKT信号通路PI3K-AKT信号通路 激活后为检测活化的akt水平（p－akt）什么时候取标本合适呢不知道什么时候活化的（p－akt）到高峰水平急求助不胜感激drwei2008 48-72 比较好 ，最好自己再摸一下条件。zhuangzongdxy 谢谢 十分感谢想知道您的联系方式具体再问您 可否本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你 ...

dingding2004 想找一个药物来阻断SMAD4 的作用。不知有没有做过的。SMAD4 是在转录水平发挥作用的，如果有这种药物，加在要干预的细胞培养液中，可以发挥作用吗？dingding2004 自己顶下啊caoying207 唉，没想到2年以后，我也在找SMAD4阻断剂（抑制剂 ），前辈，你找到了吗？skyzhuz 半年后我看了这个帖子，发现两位前辈还是没找到啊。。。taoist_zc SB431542 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的 ...

xwj10096 我刚开始涉及信号通路，看过一些文献，问一个菜问题：细胞水平的信号通路需要动物水平验证吗？细胞水平有效，但在机体复杂内环境下一定有效存在吗？zhengfeifei 这与你要研究的问题有关：1）如果想证明外界因素是否通过某一已知的信号转导通路起作用，如施加XX因子对细胞的影响，这涉及到胞外环境与胞膜上或胞内受体的相互作用，这时做动物实验会更为严谨，以证明in vivo 和in vitro的结果是相同的，如果不做，只能 ...

goodlucky 各位战友，小弟想做一个药物干预后信号通路的检测，看药物是否对信号通路有影响，比如ERK、JNK、p38等，请问如何检测这些通路是否被激活或抑制，是否只用简单的磷酸化抗体吗，这些磷酸化的抗体都用商品化的吗？谢谢！zhengfeifei 每个通路需要两种抗体，如ERK通路需要 ERK抗体和 P-ERK抗体，这里ERK抗体起到“内参的”作用，代表ERK的总量，药物干预前后的量通常保持不变；而P-ERK抗体用来检测磷酸 ...