• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【求助】检测细胞间隙连接,划痕染料示踪实验问题!!!

        丁香园论坛

        2035
        我的方法是将人正常肝细胞(买的细胞株)在六孔板内的盖玻片上,待长满融合后,在六孔板内操作,用PBS洗三次,加0.05% lucifer yellow染料1ML,然后用手术刀片在玻片上划痕,放回培养箱内孵育5-8分钟(3分钟也试过),然后PBS洗2-3次,取出盖玻片在荧光显微镜下观察,细胞未经任何处理,染料传输情况很不理想,我在文献中查到正常细胞应该能传到离划痕4-5层才对,为什么我的做出来没有传输,图我贴上来了,不知是什么问题!!后来我用小鼠原代皮肤成纤维细胞染色,效果仍然如此,
        这是我用小鼠成纤维细胞染色的照片
        我曾经做过大鼠肺2型细胞,效果还可以,至少能传递3层。当时用的是荧光素钠,好像分子量比荧光素还要小。是不是分子量小,穿透力就强啊(我很久没碰实验了,也许是错的)
        谢谢楼上,文献中我没查到用荧光素钠的,实验还是没有进展,还有人做过这个实验吗,
        人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的!
        人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的!
        没有检测,但原代成纤维细胞有文献报道是存在间隙连接的。目前实验仍停止,有没有人做过这个实验,我可以前去学习学习。
        请问最后你做出来了吗?我用了荧光黄锂盐染料,同样没做出来,求指教!

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序