生物化学技术

GENERAL PROCEDURE The most popular extraction procedure is that of Folch (Folch et al. J Biol Chem 1957 226 497): Folch method The tissue is homogenized with chloroform/methanol (2/1) to a final vol ...

PROCEDURE 1. Resuspend tissue/extract in 5 volumes of 1:1 chloroform/methanol by vortexing (to homogeneity or as close as possible) 2. Add the same volume of a 1M KCl 0.2M Phosphoric acid solution a ...

Several extraction procedures may be found in books and articles aiming at the improvement of lipid recovery from any kind of organisms tissues or cell types. After the first famous studies of Chevreu ...

食品中脂肪的存在形式有游离态的，也有结合态的。游离态的脂如动物性脂肪和植物性脂肪。结合态的脂如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等中的脂肪与蛋白质或碳水化合物等成分形成的结合态。对大多数食品来说，游离态的脂肪是主要的，结合态的脂肪含量较少。 一、 提取剂的选择 脂类的结构比较复杂，到现在没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来，也就是说提取出来的都是粗脂肪。（大部分是脂肪，还有一些其他成分）。 前面讲性质时讲到， ...

（1）脂肪酸的种类　在天然脂肪中，脂肪酸的种类甚多。各种天然脂肪酸分子是由不同碳链（4～24C）所组成的直链脂肪酸。除个别例外，碳原子均为双数。此类脂肪酸有两种分类法：一种是根据碳原子数将脂肪酸分为短链（4-6C）、中链（8-12C）及长链（12C以上）脂肪酸。另一种是将脂肪酸分为饱和及不饱和脂肪酸。饱和脂肪酸的一般分子式为CnH2nO2，而不饱和脂肪酸带有1、2、3个以至更多的双键，其一般分子式 ...

请问各位前辈们，在配制细胞培养液（主要是胚胎培养液）时，哪些成分需要分开溶解（分成A、B液），最后才混合到一起？配制试剂时有没有个大体的原则，哪些情况下得分开配制呢，原因是什么？ 不同的培养液在配制的时候其成分不同，要注意的事项也不同。一、配制首先要保证每种成分都是合格的。1 水的质量很关键，最少是三蒸，电阻率在0.1-1.0×10-6Ω•cm 以上。2 血清等其 ...

方法： 试剂试剂甲：A液：Na2CO3 10.00gNaOH 2.00g酒石酸钾钠（或钾盐钠盐） 0.25g混合、溶于500ml蒸馏水中。B液：CuSO4·5H2O 0.5gH2O 100.00ml用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲。试剂乙：于磨口回流瓶加入下列试剂Na2WO4·2H2O 100.00gNaMoO4·2H2O 25.00gH2O 70 ...

（1）xinglinzi 提到PBS的配制是用：NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4•H2O 1.56g，KH2PO4 0.2g，pH7.4 灭菌。我查到其他文献用的是：NaCl 160g，KCl 4g， Na2HPO4•12H2O 58g，KH2PO4 48g， pH7.4 灭菌。对比起来，就是终液量不同，差20倍而已，但两组中的不同处是一个用的Na2HPO4 ...

2D中有很多要现配或者现加的东西，非常烦人，不知道各位是怎么处理这种情况的，比如水化液中现加DTT每次只有几毫克，或者1-2毫克，称量起来难度很大，可不可以配成储存液呢？但是配成储存液后不是和直接分装前就加到水化液中不是一样吗？欢迎大家提宝贵意见！ 可以，水化液你可以先配成储液，即不加dtt及两性电解质的溶液，分装好1毫升每管，储存在-20的冰箱里对于dtt ，可以先配成1M的储液，配大约1ml ...

最近要做一些培养基，有一些糖类需要过滤除菌，但不知道怎么操作，还需要什么辅助设备？ 你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了，一般在超净工作台上进行。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格，指的是滤膜的孔径大小吧。一般0.22就够了！ 如果溶液的量比较大，超过500ml，可以采用已灭菌的抽滤瓶，预先垫好0.22um 的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢，使用时，不用在无菌室中进行，只要保证收 ...

称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）19.07g（注意不能烘干），置于1000ml溶量瓶中，溶于无二氧化碳的水中，加甲醇227ml甲醇，用无二氧化碳的水稀释至刻度，即得（pH值可用硼酸或氢氧化钠进行调整）。存放时，应防止空气中的二氧化碳进入。 补充：一般18％指得是100ml的溶液中含有18g的甲醇。我们在实验中凡是遇到百分比的浓度时都是这样处理的。 具体计算如下：甲醇密度：0.7 ...

一般也称rennin，因为容易与血管紧张肽原酶（renin）混淆，国际酶学委员会推荐使用此名，即chymosin，亦称rennet，Chymogen，Lab（德语），remnase。是一种蛋白酶，EC3．4．23．4。存在于幼龄的反刍动物的胃液中，很类似胃蛋白酶，但凝乳作用（即酪蛋白→衍酪蛋白的转变作用）远比胃蛋白酶强。分解血红蛋白的最适pH约3.5。随着动物的生长，胃中的凝乳酶减少，为 ...

一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个 50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选 ...

铺板 铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。通常，板的质 ...

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相，以蛋白质等样品为移动相，分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 （一）原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团，当结合阳离子基团时，可换出阴离子，则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基（Dicthylaminoethyl，DEAE）纤维素。在纤维素上结合了DEAE，含有带正电荷的阳离子纤维素―O―C6H14 N+ ...

利用指示剂或可产生颜色反应的化合物作为检验微生物糖代谢的方式。

1、1M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0） □组份浓度 1 M Tris-HCl □配制量 1L □配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 ...

1.5 mol/L Tris (PH8.8)1．称量181.7g Tris置于1L烧杯中。2．加入约800 ml去离子水，充分搅拌溶解。3．用浓盐酸调节pH值至8.8。4．定容至1L.5．高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1oC，溶液的pH值大约降低0.03个单位。（参照kara公司Catalog-N1） 1 mo ...

1.乙醇制氢氧化钾试液　　可取用乙醇制氢氧化钾液（0.5mol/L）。 2.乙醇制氨试液　　取无水乙醇，加浓氨试液使100ml中含NH3 9～11g，即得。　　本液应置橡皮塞瓶中保存。　 3.乙醇制溴化汞试液　　取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。　　本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 4.二乙基二硫代氨基甲酸银试液　　取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加氯仿适量与三乙胺1.8ml ...

常用HE试剂配制 一、苏木素 (1) Harris苏木素： 配方：苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g HgO 0.5 g 先将苏木素溶于无水乙醇中，备用。把明矾放入蒸馏水，加热溶解，再加入备用的苏木素，煮沸 2 分钟，先加入少量的氧化汞，防止氧化过程中苏木素外溢，玻棒搅拌，然后，边搅拌边加入氧化汞。加完后，立即移至冰水中，加速其冷却，静置一夜后，过滤。用前以 ...