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        SCGE中的试剂配制问题

        互联网

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        (1)xinglinzi 提到PBS的配制是用:

        NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4•H2O 1.56g,KH2PO4 0.2g,pH7.4 灭菌。

        我查到其他文献用的是:

        NaCl 160g,KCl 4g, Na2HPO4•12H2O 58g,KH2PO4 48g, pH7.4 灭菌。

        对比起来,就是终液量不同,差20倍而已,

        但两组中的不同处是一个用的Na2HPO4•H2O,另一个是Na2HPO4•12H2O,请教各位这是文献上的笔误还是都有用的?

        (2)还有Triton X-100( 1%)和DMSO 100ml (10%)的稀释剂问题,也用上述PBS吗?

        (3)也有用的浓度是Triton X-100( 5%)和DMSO 100ml (10%),我想知道的是(2)和(3)那种是常用的呢?

        注:我做的是肝脏的单细胞凝胶电泳。

        1、关于PBS

        我们用的PBS应该是对的。

        你提供的配方是10乘的PBS配 2 升的量。而且有些试剂的量肯定不合适。比如钾离子浓度有点大。

        2、关于Triton X-100( 1%)和DMSO 100ml (10%)的稀释剂问题。

        我们是配置890mL的裂解液体,临用前补加Triton X-100,10毫升( 1%)和DMSO 100毫升。

        3、Triton X-100( 5%)应该也可以的。但这个试剂不便宜,所以,1%可以的时候,就没有必要5%了。

        关于KH2PO4的量是我往上敲错了,应该是4.8g(而不是48g),但和你的浓度(0.2g)仍然不成比例啊?我的疑惑就在于用的是1个还是12个结晶水的Na2HPO4?对于Triton X-100和DMSO,你的意思不稀释直接添加就是,所注的1%和10%不是浓度而是添加量对吧?

        Na2HPO4几个结晶水无所谓,我用的是 1个的。如果你用n个水的,只要进行换算就可以了。

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