DNA实验技术

激光共聚焦显微镜适用于细胞生物学、细胞生理学、神经生物学和神经生理学等几乎所有涉及细胞研究的医学和生物研究领域。 在生物学上应用的最大特点是对活细胞进行无损伤性的实时观察分析。能对活细胞，组织进行形态和功能相结合的研究，包括细胞、组织结构的精确描绘、定位（二维和三维）和上述结构的动态变化，进行准确的定性、定量、定时和定位分布观察，细胞生物物质、离子的准确定性、定量、定时和定位分布检测，细胞离子通道 ...

流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析。其优点如下： 1、具有操作简便，只 ...

放射免疫分析是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素的检测灵敏性，本法的灵敏度高达ng甚至pg水平。测定的准确性良好，ng量的回收率接近100％。本法特别适用于微量蛋白质、激素和多肽的定量测定。 一、基本原理 放射免疫分析的基本原理是标记抗原（Aundefined）和非标记抗原（Ag）对特异性抗体（Ab）的竞争结合反应。它的反应式为： 在一反应系统中，作 ...

【摘　要】　【目的】探讨免疫比浊法检测糖化血红蛋白 (HbAlc) 的应用价值。 【方法】应用免疫透射比浊法和高效液相色谱法分别测定糖尿病者 (20 名) 及健康人 (20 名) 的 HbAlc水平，比较两种方法的相关性并进行不精密度分析。 【结果】两种检测方法的结果呈显著相关性 ( r = 0198，P < 0105)，不精密度分析显示免疫比浊法的CV < 5 %。 【结论】运用免疫 ...

【目的与要求】 了解IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 【仪器与材料】 IVC、超净工作台、一次性手套、口罩。 【步骤】 一、师讲述IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。　　二、学生在教师指导下进行各项基本操作。 【内容】 一、原理和结构 IVC笼盒由耐高温（至少能耐150～160℃高温以上）的透明塑料材料制成，一套笼盒由上盖、底盒、食槽、水槽、锁紧 ...

建立了随机噪音的经验模型，并通过计算机模拟超短寿命的荧光衰减过程，研究了利用取样法测量时间分辨荧光光谱实验中实验参数的选取对实验结果的影响。结果表明，增大“门宽”可以提高信噪比，从而实现微弱荧光信号的测量；减小“延时”可以提高时间分辨率，即提高测量精度；选取不同的“门宽”时，测量结果中各个衰减组分初始荧光强度 的比例关系会发生改变，并推导出测量值与实际值的对应关系，可以从测量结果反推出实际的比例。另外，测量了GaP样品的时间分辨荧光光谱，实验结果验证了所提出的随机噪音经验模型以及提高信噪比与测量精度的方法。并且利用该结论测量了LN Er样品微弱荧光的时间分辨荧光光谱。

1、【仪器名称】：台式动物麻醉机。 2、【仪器型号】：50260。 3、【生产厂家】：美国。 4、【检测适用范围】：仅用于小型啮齿类动物麻醉。 5、【仪器使用优点、缺点】： 50260 VMC三氟氯溴乙烷气体麻醉机包括氧气和N2O气流表，流速1～1000毫升/分钟，流速自动补偿，温度自动补偿，蒸气聚集度0.5～5%。N2O与麻醉气体混合可以减小单一成份的使用计量，气流表和蒸发器装在台面上。此麻醉机 ...

【摘要】目的 对化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay ，CLIA)测定 EB 病毒衣壳抗原的 IgM抗体( EBV2VCA IgM)进行方法学评价 ，同时将其对儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis，IM)的诊断准确性与传统的 ELISA测定相比较。方法 在全自动 CLIA仪上测定88例血清标本，同时用 ELISA法测定。 ...

摘要： 介绍了核磁共振（NMR）测试技术进展，着重介绍固体高分辨核磁共振和二维核磁共振技术的进展及它们在高分子材料领域的主要应用举例。 引言 核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）现象是1946年由哈佛大学的E.M.Purcell和斯坦福大学的F.Bloch所领导的两个小组，用不同的方法观察到的。他们二人由于这项重大发现，共同分享了1952年诺贝尔物理学奖。 最初 ...

一种物质由电子激发态回复到基态时，释放出的能量表现为光的发射，称为发光（luminescence）。发光可分为三种类型：光照发光、生物发光和化学发光。 1、光照发光（photoluminescence）发光剂经短波长入射光照射后进入激发态，当回复至基态时发出较长波长的可见光（见第十七章）。 2、生物发光（bioluminescence）典型例子为萤火虫发光。反应底物为萤火虫光素（fireflylu ...

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物 ...

一、器材 剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器（1ml、10ml，25ml）附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶（200ml）或平皿（直径18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等。 二、试剂 生理盐水（或PBS） 弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvan ...

DNA电泳 agarose胶

凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一，DNA的凝胶电泳和RNA 电 泳

DNA酶解技术的应用 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作

1.葡萄糖异构酶（GI）在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后，用双引物法对GI基因进行体外定点诱变，以脯氨酸（Pro138）替代Gly138，含突变体的重组质粒在大肠杆菌中表达，结果突变型GI比野生型的热半衰期长一倍；最适反应温度提高10～12℃；酶比活相同。据分析，Pro替代Gly138后，可能由于引入了一个吡咯环，该侧链刚好能够填充 ...

DNA的琼脂糖凝胶电泳

1．30%丙烯酰胺溶液 【配制方法】 将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。 【注意】 丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和 ...

一、核酸及蛋白质常用数据 1．核苷三磷酸的物理常数 化合物 分子量 λmax(pH7.0) ...

【实验目的】 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。 【实验原理】 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种杂聚多糖，是由D型和L型半乳糖以α-1，3和β-1，4糖苷键相连形成的线状高聚物（如下图所示）。琼脂糖遇冷水膨胀，溶于热水成溶胶，冷却后成为孔径范围从50nm到大于200nm的凝胶。 琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段最为常用的方法之一，这种方法简便易行 ...