核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准
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核酸及蛋白质常用数据
1．核苷三磷酸的物理常数
化合物 | 分子量 | λmax(pH7.0) | 1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值 | OD280/OD260 |
ATP | 507 | 259 | 15400 | 0.15 |
CTP | 483 | 271 | 9000 | 0.97 |
GTP | 523 | 253 | 13700 | 0.66 |
UTP | 484 | 262 | 10000 | 0.38 |
dATP | 494 | 259 | 15200 | 0.15 |
dCTP | 467 | 271 | 9300 | 0.98 |
dGTP | 507 | 253 | 13700 | 0.66 |
dTTP | 482 | 267 | 9600 | 0.71 |
2．常用核酸的长度与分子量
核酸 | 核苷酸数 | 分子量 |
λDNA | 48502（双链环状） | 3.0×107 |
pBR322 | 4363（双链） | 2.8×106 |
28SrRNA | 4800 | 1.6×106 |
23SrRNA | 3700 | 1.2×106 |
18SrRNA | 1900 | 6.1×105 |
19SrRNA | 1700 | 5.5×105 |
5SrRNA | 120 | 3.6×104 |
tRNA（大肠杆菌） | 75 | 2.5×104 |
3．常用核酸蛋白换算数据
（1）重量换算
1μg=10-6g 1pg=10-12g
1ng=10-9g 1fg=10-15g
（2）分光光度换算：
1A260双链DNA=50μg/ml
1A260单链DNA=30μg/ml
1A260单链RNA=40μg/ml
（3）DNA摩尔换算：
1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端
1μg pBR322 DNA=0.36pmol
1pmol 1000bp DNA=0.66μg
1pmol pBR322=2.8μg
1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿
1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿
1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿
（4）蛋白摩尔换算：
100pmol分子量100，000蛋白质=10μg
100pmol分子量50，000蛋白质=5μg
100pmol分子量10，000蛋白质=1μg
氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿
（5）蛋白质/DNA换算：
1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质
10，000MW蛋白质=270bp DNA
30，000MW蛋白质=810bp DNA
50，000MW蛋白质=1.35kb
100，000MW蛋白质=2.7kb DNA
4．常用蛋白质分子量标准参照物
| （1）高分子量标准参照 | （2）中分子量标准参照 | （3）低分子量标准参照 | |||
| 肌球蛋白 | 分子量 | 磷酸化酶B | 97，400 | 碳酸酐酶 | 31，00 |
| 肌球蛋白 | 212，000 | 牛血清白蛋白 | 66，200 | 大豆脻蛋白酶 | 21，500 |
| β-半乳糖甘酶B | 116，000 | 谷氨酶脱氢酶 | 55，000 | 抑制剂 | |
| 磷酸化酶B | 97，400 | 卵白蛋白 | 42，700 | 马心肌球蛋白 | 16，900 |
| 牛血清白蛋白 | 66，200 | 醛缩酶 | 40，000 | 溶菌酶 | 14，400 |
| 过氧化氢酶` | 57，000 | 碳酸酐酶 | 31，000 | 肌球蛋白（F1） | 8，100 |
| 醛缩酶 | 40，000 | 大豆脻蛋白酶 | 21，500 | 肌球蛋白（F2） | 6，200 |
| 抑制剂 | 肌球蛋白（F3） | 2，500 | |||
| 溶菌酶 | 14，400 |
5．常用DNA分子量标准参照物
|
λDNA/HindⅢ |
λDNA/EcoRⅠ |
λ/HindⅢ+EcoRⅠ |
pBR322/HaeⅢ |
|
|
23130 |
21226 |
21227 |
587 |
123 |
|
9416 |
7421 |
5148 |
405 |
104 |
|
6557 |
5804 |
4973 |
504 |
89 |
|
4361 |
5643 |
4268 |
458 |
80 |
|
2322 |
4843 |
3530 |
434 |
64 |
|
2027 |
3530 |
2027 |
267 |
57 |
|
564 |
1904 |
234 |
51 |
|
|
125 |
1584 |
213 |
21 |
|
|
1375 |
192 |
18 |
||
|
974 |
184 |
11 |
||
|
831 |
124 |
7 |
||
|
564 |
||||
|
125 |
常用抗生素溶液
|
|
贮存液a |
工作浓度 |
||
|
浓度 |
保存条件 |
严紧型质粒 |
松弛型质粒 |
|
| 氨苄青霉素 | 50mg/ml(溶于水) |
-20℃ |
20μg/ml |
60μg/ml |
| 羧苄青霉素 | 50mg/ml(溶于水) |
-20℃ |
20μg/ml |
60μg/ml |
| 氯霉素 | 34mg/ml(溶于乙醇) |
-20℃ |
25μg/ml |
170μg/ml |
| 卡那霉素 | 10mg/ml(溶于水) |
-20℃ |
10μg/ml |
50μg/ml |
| 链霉素 | 10mg/ml(溶于水) |
-20℃ |
10μg/ml |
50μg/ml |
| 四环素b | 5mg/ml(溶于乙醇) |
-20℃ |
10μg/ml |
50μg/ml |
a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
