针对特殊细胞的外泌体专用培养基使用流程

一、外泌体专用无血清培养基（肿瘤细胞及 T 细胞）

操作指南：

1、 细胞复苏及传代：细胞复苏后使用完全培养基培养 2~3 代至细胞生产状态正常；

2、 阶段培养一：待细胞汇合度约为 50% 时，移去原有完全培养基，添加新培养基（50% 外泌体专用无血清培养基+50% 完全培养基）；

3、 阶段培养二：待细胞在梯度培养一中生长汇合度约为 70-80% 时，移去原有的 50% 外泌体专用无血清培养基+50% 完全培养基；

4、 使用 1×PBS 溶液将细胞润洗 2~3 次；

5、 加入外泌体专用无血清培养基继续培养 24~48 h，待细胞汇合度到 90%~100% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌体提取实验。

使用本产品用量参考：

 

 

二、外泌体专用间充质干细胞培养基

操作指南：

1、 使用含血清、血小板提取物或含多种蛋白因子的无血清培养基进行 MSC 常规培养；

2、 MSC 细胞在上述培养基中培养一定时间，贴壁汇合度在 25%~50% 时，移去培养基；

3、 使用 PBS 清洗细胞 3~5 遍，避免外源杂质物的污染；

4、 外泌体专用间充质干细胞培养基与添加剂，采用 100:1 比例混合制成完全培养基，使用时无需再添加谷氨酰胺；

5、 改换完全培养基培养 MSC 细胞，持续培养 24~48 h，细胞融合率达到 80% 左右后，收取上清液提取外泌体（如需收集更多外泌体，在细胞状态良好的情况下可每 24 h 更换完全培养基和收集上清液）。

注：完全培养基现配现用，2~8℃ 避光存储，一周内用完；添加剂如需多次配制，建议分装冻存。

使用本产品用量参考：