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TBP(TATA box binding protein)要怎么做EMSA实验?它是碱性蛋白,等电点在9.8左右,如果用0.5xTBE电泳(PH8.2),它会带正电荷,跑不到胶里?我之前用0.5xTBE做了几次都是只有游离探针,没有阻滞条带。
查阅文献发现电泳条件没有大的改变,就是用的0.5xTBE,加了0.05%NP40,1mM EDTA。
现在不知道要改什么条件,TBE缓冲液能调到PH10吗,好像已经超过缓冲范围了?
用文献的电泳条件会有用?是什么原理?
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