同步优于G1/S期

一、双胸苷同步化法

1. 往指数生长期细胞培养物中加入 2 mmol/L 的胸苷，孵育 12 小时。

2. 600 g 离心，去含胸苷培养基，换上正常培养基轻轻重悬细胞，让细胞生长 10~12 小时使完全走出 S 期。

3. 加入胸苷至 2 mmol/L，孵育 12~14 小时。

4. 600 g 离心，去含胸苷培养基，换上正常培养基释放同步化细胞。

5. 取样，用流式细胞计量仪监测细胞通过 S 期的进程。

二、含羞草氨酸俘获法

1. 往指数生长期细胞中加入腺苷至终浓度为 2 mmol/L，孵育 12 小时。

2. 600 g 离心，去含胸苷培养基，用正常培养基轻轻重悬细胞，培养 10~12 小时让其走完 S 期。

3. 加入终 400 μm 的含羞氨酸终止细胞生长。

4. 继续培养 12~14 小时，让细胞走完 G1 期，止于 G1/S 边境。

5. 撤换含羞草氨酸培养基，于 37℃ 用 DMEM 培养基洗涮细胞，加入预温至 37℃ 的完全生长培养基让细胞释放生长。

6. 取样，用流式细胞计量仪监测细胞通过 S 期的进程。