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        胶原的配制

        相关实验:天然培养基配制实验

        最新修订时间:

        原理

        胶原是细胞生长良好的基质,它是从动物特定组织中用人工法提取出的,利于组织和细胞的固定,亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着,能改善细胞表面性质,促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等,其中以鼠尾胶原最为常用和制备简便,可配制成0.1%—1%的醋酸溶液,

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  取组织

        取体重250 g 左右大白鼠一只,从尾根部切断鼠尾,置75%酒精中浸
        泡30 分钟;无菌条件下将鼠尾切成1.5 cm 小段,剔除皮毛,抽出尾腱置平皿中;
         
        2.  溶解

        取1.5 g 剪碎尾腱浸入150ml 醋酸溶液(0.01—0.25 M),置4℃冰箱中,
        并不时摇动,48 小时后,移入灭菌离心管中;

        3.  分离

        以4000 转/分,离心30 分钟,吸取上清液,10 磅10 分钟高压灭菌后分
        装入小瓶中,-20℃冰箱保存;

        4.  使用方法

        用吸管吸少许胶原涂于灭菌培养瓶内壁培养面上,不宜太厚,以
        倾斜瓶时不流动为准;

        5.  向培养瓶内通以氨气后封上瓶盖;

        或用浸有氨水的棉球堵塞瓶口(或不用氨气
        处理,而是置37℃温箱过夜;或置室温48 小时,再用无菌蒸馏水冲洗凉干亦可),作用30 分钟,待胶原凝固,然后用无菌生理盐水冲洗、凉干,即可使用。

        来源:丁香实验

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