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        天然培养基配制实验

        实验分类:

        生物化学实验

        最新修订时间:

        简介

        天然培养基包括:血清、组织提取液、如鸡血浆,鸡胎汁等。其中血清是一种仍在广泛应用中的天然培养基,市场有产品出售。而血浆应用较少,因此用时多自己制备。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)

        来源:丁香实验

        操作方法

        鸡血浆的制备

        利用生长一年左右体大、健壮的雄鸡,采血压计前一天禁食,多喂水。 制备方法如下: 1. 肝素溶液制备 配制浓度20 mg/100ml 生理盐水肝素液,9 磅10 分钟高压或滤过灭菌,每小瓶中分装入0.5 ml 贮4 ℃冰箱中备用; 2. 动物准备 缚鸡于手术架上,令仰卧,从鸡翅取血;展开鸡翅,拔除翅根局部羽毛,选血管粗大部位,碘酒和酒精棉球消毒; 3. 采血

        鸡胚浸出液的制备

        1. 孵化 选健康受精鸡卵,置入37 ℃温箱孵化;箱内置有水皿,以保持箱内湿度,每日翻动卵一次(180 度); 2. 处理 孵育至9—12 日,取出鸡卵置小烧杯中,令气室端向上,用碘酒和酒精消毒蛋壳; 3. 取胚 用消毒剪剪除气室端蛋壳,小心拨开尿囊膜,用弯玻棒或变镊伸到胚体颈下方,轻轻挑起鸡胚置入平皿中; 4. 清理 去掉胚眼、血块、尿囊膜等物;用BS

        水解乳蛋白的配制

        1. 称量:称0.5 g 水解乳蛋白粉入烧杯中,加少许灭菌Hanks 液调成糊状; 2. 溶解:补加Hanks 液至100 ml,不断搅拌,令充分溶解,置室温1—2 小时,并不时搅拌; 3. 过滤:滤纸滤过,分装入瓶中; 4. 灭菌:10 磅10 分钟高压蒸汽灭菌后,4 ℃冰箱保存。

        胶原的配制

        1. 取组织 取体重250 g 左右大白鼠一只,从尾根部切断鼠尾,置75%酒精中浸泡30 分钟;无菌条件下将鼠尾切成1.5 cm 小段,剔除皮毛,抽出尾腱置平皿中; 2. 溶解 取1.5 g 剪碎尾腱浸入150ml 醋酸溶液(0.01—0.25 M),置4℃冰箱中,并不时摇动,48 小时后,移入灭菌离心管中; 3. 分离 以4000 转/分,离心30 分钟,吸取上清液

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