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- 2025年07月16日
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大量
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柯雷生物
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现货
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3年保修
容积：50L 158L
重量：130kg
输入功率：630w
储存温度：负40到负86度
制冷方式：直冷
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文献和实验jiang104820 请问各位样本在负80度放了一年多，对荧光定量PCR的结果会不会有很大影响啊？ 我前几天做了荧光定量PCR，对照组的样本是新收的组织，而实验组的样本是一年前收的，跑出来的结果几乎所有指标都跟表型相反，很郁闷啊！求解答！谢谢 shylook 跑PCR看看rna降解没 jiang104820 shylook wrote: 跑PCR看看
最近总是看到一些战友发帖求助有关酶切方面的问题，因为它影响到了后续的重组质粒构建，而且似乎都无从说起。但我认为考虑全面了还是有章可循的。 1 ：目的载体的控制 无论它是空载体还是已经插入片段的载体，都必须保证： A ：质粒最好新鲜抽提，且抽提后电泳显示正常。质粒的长期保存形式建议以平板上的单克隆置于四度或者冻干状态于负20度，菌种尽可能以高浓度甘油状态置于负80度。 B ：质粒的多克隆位点经测序后显示正确，尤其是表达载体，需要用正反向引物测到表达起始位点，防止移码。对于外来的质粒
，1小时后转移至另一孔，再放置1小时。10 离心,洗脱(最大转速为13000转/分)11 加11ul 3M NaOH 至洗脱液,37度，15分钟。1g NaOH+8.3ml H2O----3M NaOH12 加44ul 8M NH4Oac，1ul的糖原（glycogen）及三倍体积（约300ul）冰冷乙醇（100%），负20度过夜。0.6166g+1ml H2O----8M NH4Oac第三天13 4度离心4min（14500转/min），以70%乙醇洗沉淀物真空干燥，加30ul H2
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