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        鸡胚浸出液的制备

        相关实验:天然培养基配制实验

        最新修订时间:

        原理

        鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等,有刺激细胞生长作用,为早年培养使用的培养用液,现已被合成培养液所代替,但在某些研究中仍有一定应用价值。

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  孵化

        选健康受精鸡卵,置入37 ℃温箱孵化;箱内置有水皿,以保持箱内湿
        度,每日翻动卵一次(180 度);

        2.  处理

        孵育至9—12 日,取出鸡卵置小烧杯中,令气室端向上,用碘酒和酒
        精消毒蛋壳;

        3.  取胚

        用消毒剪剪除气室端蛋壳,小心拨开尿囊膜,用弯玻棒或变镊伸到胚
        体颈下方,轻轻挑起鸡胚置入平皿中;

        4.  清理

        去掉胚眼、血块、尿囊膜等物;用BSS 冲洗鸡胚;

         
        5.  粉碎

        置入烧杯中用剪刀剪碎胚体后,再用组织研磨器研磨;或放入20—50 ml
        注射器中(无针头)直接压挤入无菌小烧杯中;

        6.  浸出

        加入等量的Hanks 液,用吸管轻轻吹打均匀,密封后置37 ℃温箱中30 
        分钟;

        7.  分离

        3000 转/分,离心30 分钟,无菌取上清分装入小瓶中,-20 ℃保存;
        用前再离心一次,取上清使用。

        鸡胚浸出液的制备

        注意事项

        1.  全部操作过程要保持无菌,要剔除尿囊膜和眼睛等,以免对细胞产生不良作用。

        来源:丁香实验

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