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        基本方案1(整合性转化)

        相关实验:克隆化酵母DNA的操作实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料

        步骤

        1.  将待研究的基因亚克隆到YIP质粒。
         
        2.  用限制性内切酶在克隆化基因内部切开,使质粒线性化。
         
        3.  用1~10 μg DNA加上担体DNA转化适合的菌株,通过质粒上带的标记进行选择,在选择培养基上纯化几个转化子,制备DNA,应用Southern 杂交确证整合是否发生在所期望的位点,并且测定是否发生了多重整合。

        注意事项

        如果没有单限制性酶切位点,可以在此区域用一个或多个酶消化产生一个缺口,但缺口两边须具有足够的同源序列。

        来源:丁香实验

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