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        基本方案

        相关实验:离子交换层析实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  配制离子交换层析缓冲液,安装好层析柱,但以离子交换层析缓冲液取代其中的凝胶过滤缓冲液。
         
        基本方案
        图一、用于蛋白质离子交换层析的梯度混合仪器
         
        2.  用起始梯度的缓冲液溶解含蛋白质混合物的样品。

        3.  弃去柱床上部的大部分缓冲液,并将样品加在凝胶的顶上。只要样品的离子强度不超过起始缓冲液的离子强度,上样体积不限。

        4.  让样品流入凝胶柱床,并用缓冲液冲冼层析柱的内壁,用吸管往凝胶的顼上 加一层1 cm 高的缓冲液。
         
        5.  连接梯度混合器,分部收集100个级分,每个组份相当于约1%总禅度体积。测各组分的A280以确定蛋白峰的所在,用电导表测离子强度以确定禅度的形状。

        来源:丁香实验

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